Anticorpo monoclonale di coniglio ATG4A (C1322)

Scheda di sicurezza

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante anti-ATG4A

Obiettivo: ATG4A
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto
Clonalità: Monoclonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : AMA00934

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

Trail, dimensioni sfuse o richieste personalizzate Vi preghiamo di contattarci

Dettagli del prodotto

Sfondo

Proteasi della cisteina che svolge un ruolo chiave nell'autofagia mediando sia l'attivazione proteolitica che la delipidazione delle proteine della famiglia ATG8. L'attività della proteasi è necessaria per l'attivazione proteolitica delle proteine della famiglia ATG8: scinde l'amminoacido C-terminale delle proteine ATG8 per rivelare una glicina C-terminale. L'esposizione della glicina al C-terminale è essenziale per la coniugazione delle proteine ATG8 alla fosfatidiletanolamina (PE) e l'inserimento nelle membrane, necessario per l'autofagia. Il substrato preferito è GABARAPL2 seguito da MAP1LC3A e GABARAP. L'attività della proteasi è necessaria anche per contrastare la formazione di coniugati ad alto peso molecolare delle proteine ATG8 (ATG8ilazione): agisce come un enzima deubiquitinante che rimuove l'ATG8 coniugato ad altre proteine, come ATG3.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo monoclonale di coniglio ricombinante anti-ATG4A
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina ATG4A
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario, ricombinante
Immunogeno	KLH-peptide sintetico coniugato che comprende una sequenza all'interno della proteina umana ATG4A. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 45 kD; Osservato: 45 kD
Modulo/Buffer	Liquido in PBS, pH 7,4, contenente 50% glicerolo, 0,2% BSA e 0,01% sodio azide.
Nomi alternativi	APG4A; AUTL2; Proteasi cisteina ATG4A; AUT-come la 2 cisteina endopeptidasi; Autofagina-2; Cisteina endopeptidasi 2 correlata all'autofagia - Omologo A della proteina 4 correlata all'autofagia - hAPG4A
Simbolo del gene	ATG4A
Entrez Gene	115201(Umano); 666468(Topo)
SwissProt	Q8WYN0(Umano); Q8C9S8(mouse)

*AREX ottimizza continuamente i suoi prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale. Numero di clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di ATG4A nei lisati di cellule intere di K562 (A), Hela (B), PC3 (C), rene di topo (D), muscolo di topo (E), rene di ratto (F), muscolo di ratto (G). (Dimensione della banda prevista: 45 kD; Dimensione della banda osservata: 45 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione ATG4A nella sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di tonsille umane. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione ATG4A nelle cellule A375. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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