Anticorpo monoclonale murino ATG4A (C3959)

Analisi Western blot dell'espressione di ATG4A nei lisati di cellule intere K562 (A). (Dimensione della banda prevista: 45 kD; Dimensione della banda osservata: 45 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione ATG4A nella sezione di tessuto incorporato in paraffina fissata in formalina del cervello umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione ATG4A nelle cellule Hela. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera umidificata. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 555 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Analisi citofluorimetrica delle cellule Hela utilizzando l'anticorpo Anti-ATG4A. Le cellule sono state fissate con paraformaldeide al 2% (10 minuti) e quindi permeabilizzate con metanolo al 90% per 10 minuti. Le cellule sono state incubate in albumina di siero bovino al 2% per bloccare le interazioni proteina-proteina non specifiche seguite dall'anticorpo a 37 °C per 60 minuti. L'anticorpo secondario Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 è stato incubato a 37 °C per 40 minuti. L'anticorpo di controllo dell'isotipo (linea blu) è stato utilizzato nelle stesse condizioni.