Anticorpo policlonale di coniglio AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172)

Scheda di sicurezza

AMPK alpha 1/2 (Phospho-T183/172) Rabbit Polyclonal Antibody

Caratteristiche principali e dettagli

Anticorpo policlonale di coniglio contro l'AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172)

Obiettivo: AMPK alfa 1/2 (Fosfo-T183/172)
Fonte/Ospite: Coniglio
Reattività: Umano, topo, ratto, pollo, maiale
Clonalità: Policlonale
Applicazioni: WB, IHC, IF/ICC
Coniugazione: Non coniugato
Stoccaggio: a-20°C

Marca:

N. CAT. : APA08852

US$ Scegli

Dimensioni:

50μL 100μL

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Dettagli del prodotto

Sfondo

Subunità catalitica della proteina chinasi attivata da AMP-(AMPK), una proteina chinasi sensore di energia che svolge un ruolo chiave nella regolazione del metabolismo energetico cellulare , una proteina chinasi sensore di energia che svolge un ruolo chiave nella regolazione del metabolismo energetico cellulare . In risposta alla riduzione dei livelli di ATP intracellulare, l'AMPK attiva i percorsi di produzione di energia e inibisce i processi di consumo di energia: inibisce la biosintesi di proteine, carboidrati e lipidi, nonché la crescita e la proliferazione cellulare. L'AMPK agisce tramite la fosforilazione diretta degli enzimi metabolici e con effetti a lungo termine tramite la fosforilazione dei regolatori della trascrizione.

Applicazione

Per garantire prestazioni ottimali del test, AREX consiglia di effettuare una titolazione dei reagenti su misura per ciascun sistema di analisi per ottenere risultati di rilevamento ottimali.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*I risultati sono specifici del campione-. Si prega di fare riferimento alle condizioni di analisi locali e ai parametri di test come riferimento.

Panoramica

Descrizione	Anticorpo policlonale di coniglio contro l'AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172)
Specificità	Riconosce i livelli endogeni della proteina AMPK alfa 1/2 solo quando fosforilata a T183/172.
Tipo di anticorpi	Anticorpo primario
Immunogeno	KLH-fosfopeptide sintetico coniugato corrispondente ai residui che circondano T183/172 della proteina umana AMPK alfa 1/2. La sequenza esatta è proprietaria.
Purificazione	L'anticorpo è stato purificato mediante cromatografia di affinità immunogena.
Peso Molecolare	Previsto: 64; Osservato: 63 kD
Modulo/Buffer	Liquido in 0,42% fosfato di potassio, 0,87% cloruro di sodio, pH 7,3, 30% glicerolo e 0,01% azoturo di sodio.
Nomi alternativi	PRKAA1; AMPK1; 5'-AMP-subunità catalitica della proteina chinasi attivata alfa-1; subunità AMPK alfa-1; Acetil-CoA carbossilasi chinasi; ACACA chinasi; Idrossimetilglutaril-CoA reduttasi chinasi; chinasi HMGCR; Tau-proteina chinasi PRKAA1; PRKAA2; AMPK; AMPK2; subunità catalitica alfa-2 della proteina chinasi attivata 5'-AMP-; subunità AMPK alfa-2; Acetil-CoA carbossilasi chinasi; ACACA chinasi; Idrossimetilglutaril-CoA reduttasi chinasi; Chinasi HMGCR
Simbolo del gene	PRKAA1; PRKAA2
Entrez Gene	5562; 5563(Umano); 105787; 108079(Topo); 65248; 78975(Ratto)
SwissProt	Q13131; P54646(Umano); Q5EG47; Q8BRK8(mouse); P54645; Q09137(Ratto)

*AREX ottimizza continuamente i nostri prodotti. Il contenuto della pagina Web potrebbe non riflettere gli ultimi aggiornamenti. Per domande, contattare info@arexbio.com o il proprio distributore locale.
*Numero clone, reattività, origine/host e clonalità sono reperibili nel nome del prodotto e nella sezione Caratteristiche principali sopra.

Dati

Analisi Western blot dell'espressione di AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172) nei lisati di cellule intere trattate con Adriamicina-Jurkat (A), trattate con Adriamicina-K562 (B). (Dimensione della banda prevista: 64; 62 kD; Dimensione della banda osservata: 63 kD)

Analisi immunoistochimica della colorazione AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172) in una sezione di tessuto incluso in paraffina fissata in formalina di cancro polmonare umano. La sezione è stata pretrattata utilizzando il recupero dell'antigene mediato dal calore con tampone di citrato di sodio (pH 6,0). La sezione è stata quindi incubata con l'anticorpo a temperatura ambiente e rilevata utilizzando un sistema polimerico compatto coniugato con HRP. DAB è stato utilizzato come cromogeno. La sezione è stata quindi controcolorata con ematossilina e montata con DPX.

Analisi immunofluorescente della colorazione AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172) nelle cellule MCF7. Le cellule fissate in formalina-sono state permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1% in TBS per 5-10 minuti e bloccate con BSA-PBS al 3% per 30 minuti a temperatura ambiente. Le cellule sono state sondate con l'anticorpo primario in BSA-PBS al 3% e incubate per una notte a 4°C in una camera nascosta. Le cellule sono state lavate con PBST e incubate con un anticorpo secondario coniugato AREX® Fluor 488 - (verde) in PBS a temperatura ambiente al buio. Falloidina - AREX® Fluor 594 è stato utilizzato per colorare i filamenti di actina (rosso). DAPI è stato utilizzato per colorare i nuclei delle cellule (blu).

Curva dose-risposta dell'anticorpo ELISA diretto utilizzando l'anticorpo Anti-AMPK alfa 1/2 (Phospho-T183/172). La concentrazione dell'antigene (fosfopeptide e non-fosfopeptide) è 5 ug/ml. Anti-IgG di capra-coniglio (H&L) - L'HRP è stato utilizzato come anticorpo secondario e il segnale è stato sviluppato dal substrato TMB.

Stoccaggio

Conservare a 4°C per breve termine. Per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C, evitando cicli di gelo/scongelamento.

Nota

Solo per uso di ricerca. Da non utilizzare in procedure diagnostiche.

Domande frequenti

Quali sono i principali tipi di anticorpi di ricerca e in cosa differiscono?

Gli anticorpi di ricerca si dividono principalmente in anticorpi monoclonali e anticorpi policlonali. Gli anticorpi monoclonali offrono tipicamente una specificità più elevata e una migliore consistenza batch-to-batch, mentre gli anticorpi policlonali spesso forniscono un'affinità più forte ma possono mostrare una maggiore variazione tra i lotti. La scelta dipende dalle vostre specifiche esigenze sperimentali.

Come posso sapere se un anticorpo di ricerca è adatto al mio esperimento?

Si consiglia di rivedere attentamente la scheda tecnica del prodotto per applicazioni convalidate, reattività delle specie, diluizioni consigliate e riferimenti pubblicati. Per i nuovi anticorpi, in genere è utile eseguire una validazione su piccola scala con campioni di controllo positivo.

La conservazione impropria degli anticorpi di ricerca può influenzare i risultati sperimentali?

SÌ. Gli anticorpi sono sensibili alla temperatura, ai ripetuti cicli di congelamento/scongelamento e alla contaminazione. Una memorizzazione non corretta può comportare una riduzione dell'attività, un aumento del background o segnali più deboli. È meglio seguire le istruzioni di conservazione fornite nella scheda tecnica del prodotto.

Perché la diluizione consigliata nella scheda tecnica non funziona bene nel mio esperimento?

La diluizione consigliata si basa sulle condizioni di prova del fornitore. Fattori come il tipo di campione, il metodo di fissazione e il sistema di rilevamento del laboratorio possono influenzare la concentrazione di lavoro ottimale. Spesso è necessario eseguire un'ottimizzazione della serie di diluizioni nel proprio sistema.

Quali precauzioni dovrei prendere quando utilizzo per la prima volta un anticorpo di ricerca appena acquistato?

Si consiglia di centrifugare brevemente l'anticorpo (soprattutto quelli concentrati o liofilizzati), quindi eseguire un esperimento pilota su piccola scala utilizzando le condizioni raccomandate. Anche la registrazione del numero di lotto e della data di utilizzo è utile per il monitoraggio futuro.

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