Antibodi Monoklonal Kelinci PD-L1 (ARA730)

Semua jalur: Antibodi anti-PD-L1 pada pengenceran 1:5.000
Prediksi UM: 33 kDa
UM yang diamati: 40-50 kDa

Jalur 1: HEK293 Ekspresi HuPD-L1 yang berlebihan
Jalur 2: HEK293

Lisat pada 5 μg per jalur
Ab ke-2:
GAR HRP(H+L) 1:10.000
Eksposur: 100 detik

Analisis imunohistokimia (Formalin/PFA-parafin tetap-bagian tertanam) jaringan adenokarsinoma paru manusia berlabel PD-L1 dengan ARA730 pada 1:200. Pengambilan antigen yang dimediasi panas dilakukan menggunakan buffer Tris/EDTA pH 9.0.

Pewarnaan ARA730 sebanyak 293 sel ditransinfeksi dengan gen PD-L1 secara IF/ICC (imunofluoresensi/imunositokimia). Sel difiksasi dengan paraformaldehyde, permeabilisasi dengan 0,1% Triton X-100 dan diblokir dengan 10% serum kambing selama setengah jam pada suhu kamar. Sampel diinkubasi dengan antibodi primer (1:10.000) pada suhu 4°C. Poliklonal IgG Kambing Terkonjugasi Alexa Fluor® 488-terkonjugasi digunakan sebagai antibodi sekunder (1:500). DAPI (biru) digunakan sebagai pewarna penghitung nuklir.
Pengendalian: PBS dan antibodi sekunder, Alexa Fluor® 488-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).

Histogram overlay menunjukkan 293 sel yang ditransfeksi dengan gen PD-L1 yang diwarnai dengan ARA730. Sel-sel kemudian diinkubasi dalam antibodi (ARA730, pengenceran 1:200) dalam 1x PBS/1% BSA selama 30 menit pada suhu kamar. Antibodi sekunder yang digunakan adalah Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) dengan pengenceran 1:2.000 selama 20 menit pada suhu kamar. Sampel yang tidak berlabel (Hitam) digunakan sebagai kontrol.

PD-L1 di imunopresipitasi dari 0,2 mg 293 sel utuh lisat yang ditransfeksi dengan gen PD-L1 dengan ARA730 pada pengenceran 1:30.

Ab ke-2: GAR HRP untuk IP 1:500

Jalur 1: IP ARA730 dalam 293 sel utuh lisat ditransfeksi dengan gen PD-L1

Jalur 2: PBS sebagai pengganti ARA730 pada 293 sel utuh lisat yang ditransfeksi dengan gen PD-L1

Jalur 3: 293 lisat sel utuh ditransfeksi dengan gen PD-L1, 2 μg (input)

Eksposur: 10 detik