Anticuerpo monoclonal de conejo vimentina (ARA732)

Hoja de datos

MSDS

Vimentin Rabbit Monoclonal Antibody(ARA732)

Características y detalles clave

Objetivo: vimentina
Fuente/Anfitrión: Conejo
Reactividad: Humano, Ratón, Rata
Clonalidad: monoclonal
Aplicaciones: WB, IHC, FC, IF/ICC, IP
Conjugación: Sin conjugar
Almacenamiento: a-20°C

Marca:

CAT.NO. : ARA6519

US$ Por favor elige

Tamaño:

100μL

Sendero, tamaño a granel o solicitudes personalizadas Por favor contáctenos

Detalles del producto

Antecedentes

Las vimentinas son filamentos intermedios de clase III que se encuentran en varias células no epiteliales, especialmente en las células mesenquimales. La vimentina está unida al núcleo, al retículo endoplásmico y a las mitocondrias, ya sea lateralmente o terminalmente. Desempeña un papel en el movimiento direccional celular, la orientación, la organización de la lámina celular y la polarización del complejo de Golgi en el frente de migración celular. Protege SCRIB de la degradación proteasomal y facilita su localización en filamentos intermedios de manera mediada por contacto celular. Puede promover el crecimiento de axones y la reparación de fibras motoras mediante el reclutamiento mediado por DSP en las puntas de crecimiento.

Solicitud

Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB	1:5000-1:10000
IHC	1:100-1:200
FI/CCI	1:2000-1:10000
FC	1:10-1:200
IP	1:20

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.

Descripción general

Descripción	Anticuerpo monoclonal de conejo contra vimentina
Tipo de anticuerpo	Anticuerpo primario
MW previstos	54kDa
inmunógeno	Se utilizó como inmunógeno un péptido sintético correspondiente a residuos en el extremo C de la vimentina humana.
Purificación	IgG purificada por afinidad ProA
Formulario/búfer	PBS 59%, Azida de sodio 0,01%, Glicerol 40%, BSA 0,07%.
Nombres alternativos	vimentina
Símbolo genético	VIM
Entrez Gene	7431 (humano)
Swissprot	P08670

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.

Datos

Todos los carriles: Anticuerpo anti-Vimentin en dilución 1:5000
MW previsto: 54 kDa
MW observado: 54 kDa

Carril 1: Hela
Carril 2: HEK293
Carril 3: A549
Carril 4: 3T3

Lisado a 10 μg por carril
2do abdominal:
G&R HRP(H+L) 1:10.000

Exposición: 100s

Todos los carriles: Anticuerpo anti-Vimentin en dilución 1:5000
MW previsto: 54 kDa
MW observado: 54 kDa

Carril 1: Mu Corazón
Carril 2: Corazón de rata

Lisado a 10 μg por carril
2do abdominal:
G&R HRP(H+L) 1:10.000

Exposición: 20s

Análisis de inmunohistoquímica (formalina/PFA-parafina fijada-secciones incluidas) de tejido de colon humano que marca vimentina con ARA732 a 1:100. La recuperación de antígeno mediada por calor se realizó utilizando tampón Tris/EDTA pH 9,0.

Histograma superpuesto que muestra células Hela teñidas con ARA732 (azul). Las células se fijaron con paraformaldehído al 4% (10 min) y luego se permeabilizaron con TritonX-100 al 0,1% durante 15 min. Luego, las células se incubaron en el anticuerpo (ARA732, dilución 1:10) en 1x PBS/BSA al 1% durante 30 minutos a 4°C. El anticuerpo secundario utilizado fue un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) a una dilución 1:2000 durante 20 min a 4°C. Se utilizó como control una muestra sin etiquetar (roja).

Tinción con ARA732 con vimentina en células Hela mediante IF/ICC (inmunofluorescencia/inmunocitoquímica). Las células se fijaron con paraformaldehído, se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% y se bloquearon con suero de cabra al 10% durante media hora a temperatura ambiente. Las muestras se incubaron con anticuerpo primario (1:2000) a 4°C. Se utilizó un policlonal IgG de cabra anticonejo conjugado con Alexa Fluor® 488 como anticuerpo secundario (1:500). Se utilizó DAPI (azul) como contratinción nuclear.
Control: PBS y anticuerpo secundario, IgG de conejo conjugada Alexa Fluor® 488-Cabra Anti-Conejo (1:500).

La vimentina se inmunoprecipitó a partir de 0,4 mg de lisado de Hela con ARA732 a una dilución 1:20.
2do abdominal:
GAR HRP para IP 1:500
Carril 1: ARA732 IP en lisado de células enteras de Hela
Carril 2: IgG de conejo en lugar de ARA732 en lisado de células completas de Hela
Carril 3: lisado de células enteras de Hela, 10 μg (entrada)
Exposición: años 60

Almacenamiento

Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.

Nota

Sólo para uso en investigación. No apto para uso diagnóstico, terapéutico, profiláctico o in vivo.

Preguntas frecuentes

¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?

Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.

¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?

Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.

¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?

Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.

¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?

La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.

¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?

Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.

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