Búfer ARExVisual® DAB
Características y detalles clave
- Formato: Líquido Transparente
- Aplicación: IHC
- Tienda en 2 - 8ºC
- Los usuarios deben estar capacitados en la técnica IHC antes
-
Marca:
CAT.NO. : ARB0003
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Detalles del producto
Antecedentes
La 3,3' diaminobencidina (DAB) es un cromógeno ampliamente utilizado para la tinción inmunohistoquímica. Cuando está en presencia de la enzima peroxidasa, el DAB produce un precipitado marrón que es insoluble en alcohol. Este kit puede producir una tinción DAB más sensible y más oscura con un contraste superior entre la contratinción de cromógeno y hematoxilina. La dilución de trabajo estándar es 50 μL de cromógeno DAB por 1 ml de tampón DAB, aunque la proporción se puede ajustar según se desee. Se puede alcanzar una mayor sensibilidad utilizando más cromógeno DAB que tampón DAB; el cromógeno DAB máximo se puede utilizar como 70 μl en 1 ml de tampón DAB.
Solicitud
Inmunohistoquímica para tejidos congelados y embebidos en parafina.
Uso previsto
Este cromógeno DAB producirá un depósito de color marrón al reaccionar con la peroxidasa en el sitio del antígeno objetivo. Es adecuado para su uso en peroxidasa - Métodos de tinción inmunohistoquímica basados en.
Almacenamiento y estabilidad
Tienda en 2 - 8°C. No congelar. Volver a 2 - 8°C inmediatamente después de su uso. No almacene ni realice tinciones bajo una luz intensa, como la luz solar directa. Verifique la fecha de vencimiento en la botella. No utilice los reactivos si las fechas de caducidad que figuran en la etiqueta han pasado. No lo utilice si los reactivos se vuelven turbios. No mezcle reactivos de diferentes lotes.
Prepare la solución de trabajo DAB
Agregue una gota o 50 l de cromógeno DAB (20x concentrado) en 1 ml de tampón DAB (1x). El usuario puede preparar cualquier cantidad de solución de trabajo DAB utilizando la misma proporción (1:20). Usar dentro de las 2 horas posteriores a la preparación. Se puede alcanzar la sensibilidad máxima si se utilizan 80 μl de cromógeno DAB con 1 ml de tampón.
Aplique suficiente solución de trabajo DAB para cubrir la muestra por completo. Incubar 5 - 10 minutos. Controle el desarrollo del color bajo un microscopio óptico. Enjuague los portaobjetos suavemente con agua destilada. Contrateñir, aclarar y montar en un medio de montaje adecuado.
Aplique suficiente solución de trabajo DAB para cubrir la muestra por completo. Incubar 5 - 10 minutos. Controle el desarrollo del color bajo un microscopio óptico. Enjuague los portaobjetos suavemente con agua destilada. Contrateñir, aclarar y montar en un medio de montaje adecuado.
Notas
1.La solución de trabajo DAB es liviana - sensible. Antes de aplicar la solución de trabajo DAB sobre el tejido, manténgalo en la oscuridad. Para el desarrollo del color, incube la muestra lejos de una luz intensa, preferiblemente en la oscuridad.
2.La hemoglobina, la mioglobina, el citocromo, la catalasa, los neutrófilos, los monocitos y los eosinófilos pueden contener actividad peroxidasa o pseudoperoxidasa endógena, lo que puede provocar resultados falsos - resultados positivos. Incluso tratada con reactivo bloqueador de peroxidasa, la rojiza - Es posible que aún exista pigmento marrón de las bemoproteínas. Se necesitan portaobjetos de control para una interpretación adecuada de cada conjunto de resultados de tinción de muestras: control de tejido positivo, control de tejido negativo y control de reactivo negativo (portaobjetos tratado con control de isotipo en lugar de anticuerpo primario).
2.La hemoglobina, la mioglobina, el citocromo, la catalasa, los neutrófilos, los monocitos y los eosinófilos pueden contener actividad peroxidasa o pseudoperoxidasa endógena, lo que puede provocar resultados falsos - resultados positivos. Incluso tratada con reactivo bloqueador de peroxidasa, la rojiza - Es posible que aún exista pigmento marrón de las bemoproteínas. Se necesitan portaobjetos de control para una interpretación adecuada de cada conjunto de resultados de tinción de muestras: control de tejido positivo, control de tejido negativo y control de reactivo negativo (portaobjetos tratado con control de isotipo en lugar de anticuerpo primario).
Advertencias y precauciones
1. Utilice equipo de protección personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel.
2. Las muestras, antes o después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellas, deben manipularse como si fueran infecciosos y eliminarse con las precauciones adecuadas.
3. No sustituya reactivos de otros números de lote o de kits de otros fabricantes.
4. Los tiempos de incubación o temperaturas distintas a las recomendadas deben ser validadas por el usuario.
5. La solución no utilizada debe eliminarse según las normas locales.
2. Las muestras, antes o después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellas, deben manipularse como si fueran infecciosos y eliminarse con las precauciones adecuadas.
3. No sustituya reactivos de otros números de lote o de kits de otros fabricantes.
4. Los tiempos de incubación o temperaturas distintas a las recomendadas deben ser validadas por el usuario.
5. La solución no utilizada debe eliminarse según las normas locales.
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