Anticuerpo monoclonal de ratón VCP (C3825)

Análisis de transferencia Western de la expresión de VCP en lisados ​​​​de células completas Hela (A), K562 (B), A549 (C), C6 (D), U87 MG (E), NIH3T3 (F). (Tamaño de banda previsto: 89 kD; Tamaño de banda observado: 95 kD)

Análisis inmunohistoquímico de la tinción con VCP en una sección de tejido incluido en parafina y fijado con formalina de carcinoma de mama humano. La sección se trató previamente utilizando recuperación de antígeno mediada por calor con tampón citrato de sodio (pH 6,0). Luego, la sección se incubó con el anticuerpo a temperatura ambiente y se detectó usando un sistema de polímero compacto conjugado con HRP. Como cromógeno se utilizó DAB. Luego, la sección se contratiñó con hematoxilina y se montó con DPX.

Análisis inmunofluorescente de tinción con VCP en células Hela. Las células fijadas con formalina se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% en TBS durante 5-10 minutos y se bloquearon con BSA-PBS al 3% durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las células se sondaron con el anticuerpo primario en BSA al 3%-PBS y se incubaron durante la noche a 4 °C en una cámara humidificada. Las células se lavaron con PBST y se incubaron con un anticuerpo secundario conjugado AREX® Fluor 488 (verde) en PBS a temperatura ambiente en la oscuridad. Faloidina - Se utilizó AREX® Fluor 555 para teñir los filamentos de actina (rojo). Se utilizó DAPI para teñir los núcleos celulares (azul).

Análisis de citometría de flujo de células K562 utilizando anticuerpo Anti-VCP. Las células se fijaron con paraformaldehído al 2% (10 min) y luego se permeabilizaron con metanol al 90% durante 10 min. Las células se incubaron en albúmina sérica bovina al 2% para bloquear las interacciones proteína no específicas, seguido del anticuerpo a 37 °C durante 60 minutos. El anticuerpo secundario Cabra Anti-Ratón IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 se incubó a 37 °C durante 40 min. Se utilizó el anticuerpo de control de isotipo (línea azul) en las mismas condiciones.