Anticuerpo monoclonal de ratón Tau (S305) (ARA971)

Análisis de transferencia Western de Tau (S305) mediante ARA6837.
Se procesaron varias muestras de proteínas en SDS-PAGE al 6-18% en condiciones reductoras y se transfirieron a una membrana de nitrocelulosa. Se utilizó ARA6837 como anticuerpo primario y IgG antiratón de cabra conjugada con peroxidasa como anticuerpo secundario. La banda Tau se visualizó utilizando sustrato de transferencia Western ECL.
Carril 1: 15 μg de lisado de tejido cerebral
Carril 2: 15 μg de lisado de tejido cerebral de rata
Carril 3: 15 μg de lisado de tejido cerebral de ratón2
Resultado: ARA6837 puede detectar Tau mediante transferencia Western.

IHC-P se realizó utilizando secciones de tejido cerebral fijado con formalina e incluido en parafina. El antígeno se recuperó mediante la adición de tampón Tris/EDTA hirviendo a pH 9 en una olla a presión durante 3 minutos. La actividad de la peroxidasa endógena se inactivó incubando las secciones con H₂O₂ al 3% durante 30 minutos a temperatura ambiente. Luego, las secciones se incubaron con anticuerpo primario (ARA6837) a temperatura ambiente durante 1 h. Se utilizó IgG anti-ratón de cabra conjugada con poliperoxidasa como anticuerpo secundario. Como cromógeno se utilizó diaminobencidina. La sección fue contrateñida con hematoxilina. Como control de fondo se utilizó una sección de tejido incubada con solución salina tamponada con fosfato seguida de incubación con el anticuerpo secundario.
Resultado: Neuropil se tiñe positivamente.


Análisis ELISA tipo sándwich de Tau (S305) mediante ARA6837 y ARA6844.
Las placas de microtitulación se recubrieron con ARA6844 como anticuerpo de captura. Se aplicó la proteína pTau181 recombinante (Cat. AXP6613) como antígeno. El anticuerpo pTau181 conjugado con peroxidasa (ARA6837) sirvió como anticuerpo de detección.
Resultado: ARA6837 y ARA6844 se pueden utilizar como un par de anticuerpos coincidentes para detectar y cuantificar la concentración de pTau181.

Análisis ELISA tipo sándwich de Tau (S305) mediante ARA6837 y ARA6848.
Las placas de microtitulación se recubrieron con ARA6848 como anticuerpo de captura. Se aplicó proteína pTau205 recombinante (Cat. AXP6615) como antígeno. El anticuerpo pTau205 conjugado con biotina (ARA6837) sirvió como anticuerpo de detección, seguido de incubación con estreptavidina-HRP.
Resultado: ARA6837 y ARA6848 se pueden utilizar como un par de anticuerpos coincidentes para detectar y cuantificar la concentración de pTau205.

Reactividad cruzada de ARA6837 con otros péptidos y proteínas recombinantes mediante ELISA. Los pocillos de microtitulación se recubrieron con diversos péptidos y proteínas recombinantes.
Se utilizó ARA6837 como anticuerpo primario y IgG antiratón de cabra conjugada con peroxidasa como anticuerpo secundario.
Resultado: ARA6837 puede detectar proteínas Tau independientemente de la fosforilación.

Análisis de inmunofluorescencia de Tau (S305) mediante ARA6837. Análisis de inmunofluorescencia de neuronas primarias de rata mediante el anticuerpo Tau (S305) (ARA6837). Las células se fijaron, permeabilizaron, bloquearon e incubaron con el anticuerpo primario (1:250). Seguido de una tinción secundaria con anticuerpos, se contratiñeron los núcleos.


Análisis de epítopo de Tau (S305) mediante ARA6837 mediante ELISA.
Se recubrieron pocillos de microtitulación con péptidos sintéticos que contenían los residuos indicados. También se recubrieron las proteínas recombinantes Tau (2-244), Tau (1-368), Tau (243-368) y Tau (1-441) con isoforma P10636-8 o Tau (1-758) con isoforma P10636-1. Se aplicó el anticuerpo ARA6837 como anticuerpo primario. Se utilizó IgG de cabra anti-ratón conjugada con peroxidasa como anticuerpo secundario y las señales se detectaron mediante un ensayo colorimétrico.
Resultado: ARA6837 reconoce la proteína Tau que contiene los péptidos S305 y S356 que comparten una secuencia de HVPGGG.