PD-Anticuerpo monoclonal de conejo L1 (ARA730)

Características y detalles clave

  • Objetivo: PD-L1
  • Fuente/Anfitrión: Conejo
  • Reactividad: humano
  • Clonalidad: monoclonal
  • Aplicaciones: BM, IHC, IF/ICC, FC, IP
  • Conjugación: Sin conjugar
  • Almacenamiento: a-20°C
  • Marca:
CAT.NO. : ARA6517
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Detalles del producto
Antecedentes
PD-L1 Anticuerpo monoclonal de conejo recombinante Hoja de datos del producto Peso molecular previsto: 33 kDa Pureza: IgG purificada por afinidad ProA Reactividad cruzada de especies: Forma humana: Líquido Reactividad cruzada de especies determinada por WB Swissprot ID: Q9NZQ7 Aplicaciones: WB IHC IF/ICC FC IP Antecedentes: Implicado en la señal coestimuladora, esencial para T- proliferación celular y producción de IL10 e IFNG, de manera dependiente de IL2 e independiente de PDCD1. La interacción con PDCD1 inhibe la proliferación de células T y
Solicitud
Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB

1:2500-1:5000

IHC

1:100-1:200

FI/CCI

1:2000-1:10000

FC

1:50-1:200

IP

1:30

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.
Descripción general

Descripción

Anticuerpo monoclonal de conejo contra PD-L1

Tipo de anticuerpo

Anticuerpo primario

MW previstos

33kDa

inmunógeno

Proteína recombinante de longitud completa correspondiente a PD-L1 humana. El inmunógeno contiene el dominio extracelular específico de huPD-L1 (F19-T239).

Purificación

IgG purificada por afinidad ProA

Formulario/búfer

PBS 59%, Azida de sodio 0,01%, Glicerol 40%, BSA 0,05%.

Nombres alternativos

B7H1; PDCD1L1; PDCD1LG1; PDL1; Ligando 1 de muerte celular programada 1; PD-L1; ligando 1 de PDCD1; Ligando de muerte programada 1; homólogo 1 de B7; B7-H1; CD274

Símbolo genético

CD274

Entrez Gene

29126 (humano)

Swissprot

Q9NZQ7

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.
Datos

Todos los carriles: Anticuerpo anti-PD-L1 en dilución 1:5.000
MW previsto: 33 kDa
MW observado: 40-50 kDa

Carril 1: HEK293 Sobreexpresión de HuPD-L1
Carril 2: HEK293

Lisados a 5 μg por carril
2do abdominal:
GAR HRP(H+L) 1:10.000
Exposición: 100s

Análisis de inmunohistoquímica (formalina/PFA-parafina fijada-secciones incluidas) del tejido de adenocarcinoma de pulmón humano que marca PD-L1 con ARA730 a 1:200. La recuperación de antígeno mediada por calor se realizó utilizando tampón Tris/EDTA pH 9,0.

Tinción con ARA730 de 293 células transfectadas con el gen PD-L1 mediante IF/ICC (inmunofluorescencia/inmunocitoquímica). Las células se fijaron con paraformaldehído, se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% y se bloquearon con suero de cabra al 10% durante media hora a temperatura ambiente. Las muestras se incubaron con anticuerpo primario (1:10.000) a 4°C. Se utilizó un policlonal IgG de cabra anticonejo conjugado con Alexa Fluor® 488 como anticuerpo secundario (1:500). Se utilizó DAPI (azul) como contratinción nuclear.
Control: PBS y anticuerpo secundario, IgG de conejo conjugada Alexa Fluor® 488-Cabra Anti-Conejo (1:500).

Histograma superpuesto que muestra 293 células transfectadas con el gen PD-L1 teñidas con ARA730. Luego, las células se incubaron en el anticuerpo (ARA730, dilución 1:200) en 1x PBS/BSA al 1% durante 30 minutos a temperatura ambiente. El anticuerpo secundario utilizado fue un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) a una dilución 1:2000 durante 20 min a temperatura ambiente. Se utilizó como control una muestra sin etiquetar (negra).

PD-L1 se inmunoprecipitó a partir de 0,2 mg de lisado de 293 células completas transfectadas con el gen PD-L1 con ARA730 a una dilución de 1:30.
2do Ab: GAR HRP para IP 1:500

Carril 1: ARA730 IP en lisado de 293 células completas transfectadas con el gen PD-L1

Carril 2: PBS en lugar de ARA730 en lisado de 293 células enteras transfectadas con el gen PD-L1

Carril 3: lisado de 293 células completas transfectadas con gen PD-L1, 2 μg (entrada)

Exposición: 10s

Almacenamiento
Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.
Nota
Sólo para uso en investigación. No apto para uso diagnóstico, terapéutico, profiláctico o in vivo.
Preguntas frecuentes
¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?
Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.
¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?
Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.
¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?
Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.
¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?
La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.
¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?
Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.
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