Anticuerpo policlonal de conejo NF-kappaB p65 (fosfo-T254)

MSDS

NF-kappaB p65 (Phospho-T254) Rabbit Polyclonal Antibody

Características y detalles clave

Anticuerpo policlonal de conejo contra NF-kappaB p65 (Phospho-T254)

Objetivo: NF-kappaB p65 (Fosfo-T254)
Fuente/Anfitrión: Conejo
Reactividad: Humano, Ratón, Rata, Bovino, Mono, Cerdo
Clonalidad: policlonal
Aplicaciones: BM, IHC, FI/ICC, IP
Conjugación: Sin conjugar
Almacenamiento: a-20°C

Marca:

CAT.NO. : APA09489

US$ Por favor elige

Tamaño:

50μL 100μL

Sendero, tamaño a granel o solicitudes personalizadas Por favor contáctenos

Detalles del producto

Antecedentes

NF-kappa-B es un factor de transcripción pleiotrópico presente en casi todos los tipos de células y es el punto final de una serie de eventos de transducción de señales que se inician mediante una amplia gama de estímulos relacionados con muchos procesos biológicos como la inflamación, la inmunidad, la diferenciación, el crecimiento celular, la tumorigénesis y la apoptosis. NF-kappa-B es un homo- o complejo heterodimérico formado por las proteínas que contienen dominio similar a Rel RELA/p65, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL y NFKB2/p52. El complejo heterodimérico RELA-NFKB1 parece ser el más abundante. Los dímeros se unen a sitios kappa-B en el ADN de sus genes diana y los dímeros individuales tienen distintas preferencias por diferentes sitios kappa-B a los que pueden unirse con afinidad y especificidad distinguibles.

Solicitud

Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
FI/CCI	1:50 - 1:200
IP	1:10 - 1:100

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.

Descripción general

Descripción	Anticuerpo policlonal de conejo contra NF-kappaB p65 (Phospho-T254)
Especificidad	Reconoce niveles endógenos de proteína NF-kappaB p65 solo cuando está fosforilada en T254.
Tipo de anticuerpo	Anticuerpo primario
Inmunógeno	Fosfopéptido sintético conjugado con KLH correspondiente a los residuos que rodean T254 de la proteína p65 kappaB humana NF. La secuencia exacta es propietaria.
Purificación	El anticuerpo se purificó mediante cromatografía de afinidad de inmunógeno.
Peso Molecular	Previsto: 60 kD; Observado: 65 kD
Formulario/búfer	Líquido en 0,42% de fosfato de potasio, 0,87% de cloruro de sodio, pH 7,3, 30% de glicerol y 0,01% de azida de sodio.
Nombres alternativos	NFKB3; factor de transcripción p65; Factor nuclear NF-kappa-B subunidad p65; Factor nuclear del potenciador del gen del polipéptido ligero kappa en células B - 3
Símbolo genético	RELA
Entrez Gene	5970 (humano); 19697 (ratón)
SwissProt	Q04206(Humano); Q04207(Ratón)

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.

Datos

Análisis de transferencia Western de la expresión de NF-kappaB p65 (Phospho-T254) en MCF7-LPS-30mins (A), MCF7-LPS-15mins (B), MCF7-LPS-5mins (C), MCF7 (D), Hela-TNFa-15mins (E), Hela-TNFa-5mins (F), lisados de células enteras de Hela (G). (Tamaño de banda previsto: 60 kD; Tamaño de banda observado: 65 kD)

Análisis inmunohistoquímico de la tinción de NF - kappaB p65 (Phospho - T254) en una sección de tejido incluido en parafina fijado con formalina y cáncer de mama humano. La sección se trató previamente utilizando recuperación de antígeno mediada por calor con tampón citrato de sodio (pH 6,0). Luego, la sección se incubó con el anticuerpo a temperatura ambiente y se detectó usando un sistema de polímero compacto conjugado con HRP. Se utilizó DAB como cromógeno. Luego, la sección se contratiñó con hematoxilina y se montó con DPX.

Análisis inmunofluorescente de tinción con NF-kappaB p65 (Phospho-T254) en células BV2. Las células fijadas con formalina se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% en TBS durante 5-10 minutos y se bloquearon con BSA-PBS al 3% durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las células se sondaron con el anticuerpo primario en BSA al 3% - PBS y se incubaron durante la noche a 4 ° C en una cámara hidificada. Las células se lavaron con PBST y se incubaron con un anticuerpo secundario conjugado AREX® Fluor 488 (verde) en PBS a temperatura ambiente en la oscuridad. Faloidina - Se utilizó AREX® Fluor 594 para teñir los filamentos de actina (rojo). Se utilizó DAPI para teñir los núcleos celulares (azul).

Curva dosis-respuesta de anticuerpo ELISA directo utilizando el anticuerpo Anti-NF-kappaB p65 (Phospho-T254). La concentración de antígeno (fosfopéptido y no fosfopéptido) es de 5 ug/ml. Anticabra-IgG de conejo (H&L) - Se utilizó HRP como anticuerpo secundario y la señal se desarrolló mediante el sustrato TMB.

Almacenamiento

Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.

Nota

Sólo para uso en investigación. No apto para uso en procedimientos de diagnóstico.

Preguntas frecuentes

¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?

Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.

¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?

Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.

¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?

Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.

¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?

La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.

¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?

Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.

Nuevos productos

PE-labled Human IgG1 Mouse Monoclonal Antibody(ARA651)

PE-anticuerpo monoclonal de ratón IgG1 humano marcado (ARA651)

PE-labled CD43 Mouse Monoclonal Antibody(ARA652)

Anticuerpo monoclonal de ratón CD43 marcado con PE (ARA652)

Esfingosina 1-Kit ELISA de fosfato

Kit ELISA NGAL humano

Kit ELISA KIM-1 humano

HRP-conjugated Pig IgG (H&L) Rabbit Polyclonal Antibody

HRP-Anticuerpo policlonal de conejo IgG de cerdo conjugado (H&L)