Kit ELISA TNF-α de ratón

El factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa), también conocido como caquectina y TNFSF1A, es el ligando prototípico de la superfamilia del TNF. Es una molécula pleiotrópica que desempeña un papel central en la inflamación, el desarrollo del sistema inmunológico, la apoptosis y el metabolismo de los lípidos. TNF-alfa también participa en una serie de afecciones patológicas que incluyen asma, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, dolor neuropático, obesidad, diabetes tipo 2, shock séptico, autoinmunidad y cáncer. - El TNF-alfa de ratón se sintetiza como una proteína transmembrana de tipo II de 26 kDa que consta de un dominio citoplasmático de 35 aminoácidos (aa), un segmento transmembrana de 21 aa y un dominio extracelular (ECD) de 179 aa. Dentro del ECD, el TNF-alfa de ratón comparte un 95% de identidad con la rata y un 80% de identidad con el TNF-alfa canino, equino, felino, humano, conejo y porcino. Es producido por una amplia variedad de células inmunes, epiteliales, endoteliales y tumorales. El TNF-alfa se ensambla intracelularmente para formar un homotrímero unido de forma no covalente que se expresa en la superficie celular. El TNF-alfa de la superficie celular puede inducir la lisis de células tumorales y de células infectadas por virus, y generar su propia señalización celular posterior después de la ligación mediante TNF RI soluble. La eliminación del TNF-alfa unido a la membrana por TACE/ADAM17 libera la citoquina bioactiva, un trímero soluble de 55 kDa que contiene el dominio extracelular de TNF-alfa. - El TNF-alfa se une al ubicuo TNF RI de 55-60 kDa y al TNF RII de 78-80 kDa restringido a células hematopoyéticas, los cuales también se expresan como homotrímeros. Tanto los receptores de tipo I como los de tipo II se unen al TNF-alfa con afinidad comparable y pueden promover la activación de NFkB. Sin embargo, sólo el TNF RI contiene un dominio de muerte citoplásmico que desencadena la activación de la apoptosis. Las formas solubles de ambos tipos de benéficos se liberan en el suero y la orina humanos y pueden neutralizar la actividad biológica del TNF.

pg/ml	D.O.		Promedio	Corregido
0.00	0.0121	0.0111	0.0116
1.37	0.0242	0.0223	0.0233	0.0117
4.12	0.0482	0.0444	0.0463	0.0347
12.35	0.1134	0.1092	0.1113	0.0997
37.04	0.3165	0.3032	0.3099	0.2983
111.11	0.8042	0.7996	0.8019	0.7903
333.33	1.9672	1.9564	1.9618	1.9502
1000.00	4.1683	4.2715	4.2199	4.2083

	Precisión intra-ensayo			Precisión inter-ensayo
Número de muestra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Promedio (pg/ml)	16.1	80.4	271.7	14	75.2	236.7
Desviación estándar	1.1	4.8	16	0.3	4	10.8
Coeficiente de variación (%)	6.5	5.9	5.9	2	5.3	4.6

Precisión intraensayo (Precisión dentro de un ensayo) Se analizaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.

Precisión entre ensayos (Precisión entre ensayos) Se analizaron tres muestras de concentración conocida seis veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.

La recuperación del pico se evaluó añadiendo 3 niveles de TNF alfa de ratón a una muestra de suero de ratón. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.

La recuperación osciló entre el 107% y el 132% con una recuperación media general del 116%.

Matriz de muestra	Muestra evaluada	Rango (pg/ml)	Detectables (%)	Media de detectables (pg/ml)
suero	30	nd-0.28	33	0.16

Suero/plasma: se evaluaron treinta muestras de ratones aparentemente sanos para detectar la presencia de TNF alfa en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes.

Dakota del Norte. = no-detectable. Las muestras medidas por debajo de la sensibilidad se consideran no detectables.