Kit ELISA de granzima B de ratón
Folleto de protocolo
Características y detalles clave
- Especificación:
- Sensibilidad:
- Rango de curva estándar:
- Degradado de curva estándar:
- Número de incubaciones:
- Volumen de muestra:
- Tipo de ensayo:
- Duración de la operación:
-
Marca:
CAT.NO. : AEM0016
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Tamaño:
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Detalles del producto
Antecedentes
La granzima B es un miembro de la familia de las granzimas de serina proteasas que se encuentran específicamente en los gránulos de linfocitos T citotóxicos (CTL) y células asesinas naturales (NK). La granzima B desempeña un papel esencial en la apoptosis mediada por gránulos utilizando los sustratos en este enfoque, como Caspasa 3, Caspasa 8 y Bid. Investigaciones recientes indican una funcionalidad ampliada de la granzima B para incluir funciones extracelulares junto con su función proapoptótica clásica. Se ha descubierto que la granzima B es un mediador importante de las lesiones, reparación e inflamación de la piel a través de sustratos extracelulares que incluyen laminina, cadherina VE, fibronectina y los proteoglicanos agrecano y decorina. - Como una de las cinco granzimas (A, B, H, K y M) identificadas en el genoma humano, la granzima B (32 kDa) es la más investigada en términos de su función biológica y su utilidad en la salud y la enfermedad. Se sintetiza como precursor (247 residuos) con un péptido señal (residuos 1-18), un pro-péptido (residuos 19-20) y una cadena madura (residuos 21-247). Una vez dentro de los gránulos, la granzima B se procesa completamente en la cadena madura y se convierte en una proteasa desactivada cuando el propéptido Gly-Glu se elimina del extremo N mediante escisión con catepsina C. La actividad proteasa de la granzima B está estrechamente controlada por Serpin B9/inhibidor de proteasa 9. La secuencia de aminoácidos de la granzima B humana es 71%, 69% y 68% idéntica a su homólogos caninos, ratas y ratones, respectivamente. - Se ha demostrado que las granzimas modulan la inflamación y se ha encontrado que los niveles plasmáticos de granzima B son más altos en la dermatitis atópica y la psoriasis en comparación con los controles sanos. Esto contrasta con los niveles plasmáticos de granzima A, que permanecen sin cambios. El suero de pacientes con enfermedad de Crohn tiene niveles de Granzima B significativamente más altos que los de los controles.
Datos típicos
| pg/ml | D.O. | Promedio | Corregido | |
| 0.00 | 0.0150 | 0.0130 | 0.0140 | |
| 27.43 | 0.0230 | 0.0200 | 0.0215 | 0.0075 |
| 82.30 | 0.0340 | 0.0290 | 0.0315 | 0.0175 |
| 246.91 | 0.0680 | 0.0670 | 0.0675 | 0.0535 |
| 740.74 | 0.1650 | 0.1630 | 0.1640 | 0.1500 |
| 2222.22 | 0.4570 | 0.4220 | 0.4395 | 0.4255 |
| 6666.67 | 1.2100 | 1.1460 | 1.1780 | 1.1640 |
| 20000.00 | 2.7790 | 2.7510 | 2.7650 | 2.7510 |
Precisión
| Precisión intra-ensayo | Precisión inter-ensayo | |||||
| Número de muestra | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Promedio (pg/ml) | 341.6 | 1646.5 | 5204.5 | 367.9 | 1876.2 | 5851.4 |
| Desviación estándar | 22.6 | 94.6 | 295.4 | 8.6 | 63.2 | 192.3 |
| Coeficiente de variación (%) | 6.6 | 5.7 | 5.7 | 2.3 | 3.4 | 3.3 |
Precisión intraensayo (Precisión dentro de un ensayo) Se analizaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.
Precisión entre ensayos (Precisión entre ensayos) Se analizaron tres muestras de concentración conocida seis veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.
Recuperación de picos
La recuperación del pico se evaluó agregando 3 niveles de Mouse Granzyme B a una muestra de suero de ratón sano. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.
La recuperación osciló entre el 107% y el 132% con una recuperación media general del 116%.
La recuperación osciló entre el 107% y el 132% con una recuperación media general del 116%.
Valores de muestra
| Matriz de muestra | Muestra evaluada | Rango (pg/ml) | Detectables (%) | Media de detectables (pg/ml) |
| suero | 30 | 10,64-35,31 | 92 | 24.13 |
Suero/plasma: se evaluaron treinta muestras de ratones aparentemente sanos para detectar la presencia de granzima B en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes. Dakota del Norte. = no-detectable. Las muestras medidas por debajo de la sensibilidad se consideran no detectables.
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