L-Lactil-Histona H3 (Lys18) Anticuerpo monoclonal de conejo (ARA873)-Grado ChIP

Hoja de datos

MSDS

L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA873)-ChIP Grade

Características y detalles clave

Objetivo: L-Lactil-Histona H3 (Lys18)
Anfitrión: Conejo
Reactividad: humano, ratón
Clonalidad: monoclonal
Aplicación: WB, chip, corte y etiqueta
Almacenamiento: -20°C

Marca:

CAT.NO. : ARA6699

US$ Por favor elige

Tamaño:

50μL

Sendero, tamaño a granel o solicitudes personalizadas Por favor contáctenos

Detalles del producto

Antecedentes

Las histonas son proteínas nucleares básicas que son responsables de la estructura nucleosomática de la fibra cromosómica en eucariotas. Esta estructura consta de aproximadamente 146 pb de ADN enrollado alrededor de un nucleosoma, un octámero compuesto por pares de cada una de las cuatro histonas centrales (H2A, H2B, H3 y H4). La fibra de cromatina se compacta aún más mediante la interacción de una histona conectora, H1, con el ADN entre los nucleosomas para formar estructuras de cromatina de orden superior. Este gen no tiene intrones y codifica una histona dependiente de replicación que es miembro de la familia de histonas H3. Las transcripciones de este gen carecen de colas poliA; en cambio, contienen un elemento de terminación palindrómico. Este gen se encuentra en el gran grupo de genes de histonas en el cromosoma 6p22-p21.3.

Solicitud

Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

Solicitud	Relación de dilución
WB	1:500 - 1:1000
chip	6 μg/5×10⁶ células
Cortar y etiquetar	1:100

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.

Descripción general

isotipo	IgG
Purificación	Proteína A
Localización celular	Núcleo
Formulario/búfer	PBS, glicerol, BSA
ID UniProt	P68431
Sinónimos	H3K18la
conjugado	Sin conjugar
Especificidad	Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) El mAb de conejo (grado ChIP) detecta la histona H3 solo cuando está L-lactilada en Lys18.
ID UniProt	P68431
inmunógeno	L-péptido de histona humana lactilada H3 (Lys18)
MW (kDa)	15

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.

Datos

Cantidad de péptido: 4 ng, 16 ng, 64 ng
Tampón de bloqueo: 5% NFDM/TBST
Dilución de Ab primario: 1:2000
Incubación de Ab primario: 2 horas a temperatura ambiente
Ab secundario: pAb H&L IgG anti-conejo de cabra (conjugado HRP)
Tiempo de exposición: 10 segundos
La lista de péptidos utilizados en el experimento se proporciona a continuación.
Carril 1: H3K18 L-lactilo. Carril 2: acetilo H3K18.
Carril 3: crotonilo H3K18. Carril 4: butirilo H3K18.
Carril 5: propionilo H3K18. Carril 6: H3K18 2-hidroxiisobutirilo.
Carril 7: H3K18 β-hidroxibutirilo. Carril 8: H3K18 sin modificar

Lisados: (-) células HeLa; (+) Células HeLa tratadas con lactato de sodio 25 mM durante 24 horas
Cantidad de carga de proteína: 20 μg
Tampón de bloqueo: 5% NFDM/TBST
Dilución de Ab primario: 1:1000
Incubación de Ab primario: 2 horas a temperatura ambiente
Ab secundario: pAb H&L IgG anticonejo de cabra (conjugado HRP)
Tiempo de exposición: 60 segundos
Tamaño de banda previsto: 15 kDa
Tamaño de banda observado: 15 kDa

Lisados: (-) células K562; (+) Células K562 tratadas con lactato de sodio 25 mM durante 24 horas
Cantidad de carga de proteína: 20 μg
Tampón de bloqueo: 5% NFDM/TBST
Dilución de Ab primario: 1:1000
Incubación de Ab primario: 2 horas a temperatura ambiente
Ab secundario: pAb H&L IgG anticonejo de cabra (conjugado HRP)
Tiempo de exposición: 60 segundos
Tamaño de banda previsto: 15 kDa
Tamaño de banda observado: 15 kDa

Lisados: (-) células NIH/3T3; (+) Células NIH/3T3 tratadas con lactato de sodio 25 mM durante 24 horas
Cantidad de carga de proteína: 20 μg
Tampón de bloqueo: 5 % NFDM/TBST
Dilución de Ab primario: 1:1000
Incubación de Ab primario: 2 horas a temperatura ambiente
Ab secundario: pAb H&L de cabra anti-IgG de conejo (HRP) Conjugado)
Tiempo de exposición: 60 segundos
Tamaño de banda previsto: 15 kDa
Tamaño de banda observado: 15 kDa

Muestra: células HeLa tratadas con lactato de sodio 100 mM durante 24 horas
Condiciones de reticulación: sin reticulación
Cantidad de cromatina por IP: 5×10⁶ células
Cantidad de Ab por IP: 6 μg
Tipo de perlas y cantidad por IP: 50 μL de proteína A MagBeads
Descripción: Cromatina Las inmunoprecipitaciones se realizaron con 6 μg de IgG de conejo normal como control negativo. El ADN inmunoprecipitado se cuantificó mediante PCR en tiempo real utilizando cebadores específicos para las regiones humanas GAPDH-CDS, promotor LDHA, LDHA, FOXO3a aguas abajo, RAB20 y TUBBP10. Los datos se presentan como enriquecimiento de cada muestra en relación con la cantidad total de entrada en cada amplicón.

Muestra: células HeLa tratadas con lactato de sodio 100 mM durante 24 horas
Cantidad de células: 1×10⁵ células
Dilución de Ab primaria: 1:100
Incubación de Ab primaria: 4⁰C durante la noche
Ab secundaria: pAb H&L de IgG anticonejo de cabra
Dilución de Ab secundaria: 1:1400 Descripción de
: CUT&Tag se realizó con mAb de conejo Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) junto con IgG de conejo normal como control negativo. El ADN resultante se secuenció en la plataforma Illumina NovaSeq con lecturas finales emparejadas de 150 pb y una profundidad de secuenciación de 3 millones de lecturas. La figura muestra enriquecimientos significativos de la señal de H3K18la en las regiones promotoras de CD9, PLEKHG6, LTBR y GAPDH.

Almacenamiento

Enviado a 4 ℃. Almacenar a -20 ℃ durante un año. Evite ciclos repetidos de congelación/descongelación.

Nota

Sólo para uso en investigación. No apto para uso diagnóstico, terapéutico, profiláctico o in vivo.

Preguntas frecuentes

¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?

Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.

¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?

Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.

¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?

Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.

¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?

La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.

¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?

Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.

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