Kit ELISA de VEGF humano

El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF o VEGF-A), también conocido como factor de permeabilidad vascular (VPF), es un potente mediador tanto de la angiogénesis como de la vasculogénesis en el feto y en el adulto. Es un miembro de la familia PDGF que se caracteriza por la presencia de ocho residuos de cisteína conservados en una estructura de nudo de cistina y la formación de dímeros unidos por disulfuro antiparalelos. Los humanos expresan isoformas empalmadas alternativamente de 121, 145, 165, 183, 189 y 206 aminoácidos (aa) de longitud. VEGF165 parece ser la isoforma más abundante y potente, seguida de VEGF121 y VEGF189. Las isoformas distintas de VEGF121 contienen regiones de unión a heparina básica y no se difunden libremente. El VEGF165 humano comparte un 88% de identidad de secuencia aa con las regiones correspondientes de VEGF de ratón y rata. VEGF se expresa en múltiples células y tejidos, incluido el músculo esquelético y cardíaco, hepatocitos, osteoblastos, neutrófilos, macrófagos, queratinocitos, tejido adiposo pardo, células madre CD34+, células endoteliales, fibroblastos y células del músculo liso vascular. La expresión de VEGF es inducida por hipoxia y citocinas como IL-1, IL-6, IL-8, oncostatina M y TNF-alfa. Las isoformas de VEGF se expresan diferencialmente durante el desarrollo y en el adulto. - Los dímeros de VEGF se unen a dos receptores tirosina quinasas relacionados, VEGF R1 (también llamado Flt-1) y VEGF R2 (Flk-1/KDR), e inducen su homodimerización y autofosforilación. Estos receptores tienen siete dominios extracelulares similares a inmunoglobulinas y un dominio de tirosina quinasa dividido intracelular. Se expresan en células endoteliales vasculares y en una variedad de células no endoteliales. Aunque la afinidad de VEGF es máxima para unirse a VEGF R1, VEGF R2 parece ser el mediador principal de la actividad angiogénica de VEGF. VEGF165 también se une al receptor de semaforina, neuropilina-1, que promueve la formación de complejos con VEGF R2. - VEGF es mejor conocido por su papel en la vasculogénesis. Durante la embriogénesis, VEGF regula la proliferación, migración y supervivencia de las células endoteliales, regulando así la densidad y el tamaño de los vasos sanguíneos, pero no desempeña ningún papel en la determinación de los patrones vasculares. VEGF promueve la formación ósea mediante el reclutamiento de osteoblastos y condroblastos y también es un quimioatrayente de monocitos. Después del nacimiento, VEGF mantiene la integridad de las células endoteliales y es un potente mitógeno para micro- y células endoteliales macro-vasculares. En los adultos, el VEGF actúa principalmente en la cicatrización de heridas y en el ciclo reproductivo femenino. En los tejidos enfermos, el VEGF promueve la permeabilidad vascular. Por tanto, se cree que contribuye a la metástasis tumoral al promover tanto la extravasación como la angiogénesis tumoral. Se han empleado terapéuticamente diversas estrategias para antagonizar la angiogénesis tumoral mediada por VEGF. Los niveles circulantes de VEGF se correlacionan con la actividad de la enfermedad en enfermedades autoinmunes como la artritis reumatoide, la esclerosis múltiple y el lupus eritematoso sistémico.

pg/ml	D.O.		Promedio	Corregido
0.00	0.0275	0.0264	0.0270
31.25	0.1190	0.1082	0.1136	0.0867
62.50	0.1991	0.2040	0.2016	0.1746
125.00	0.3159	0.2863	0.3011	0.2742
250.00	0.5521	0.6045	0.5783	0.5514
500.00	1.1560	1.2260	1.1910	1.1641
1000.00	2.3170	2.2130	2.2650	2.2381
2000.00	3.6280	3.4990	3.5635	3.5366

	Precisión intra-ensayo			Precisión inter-ensayo
Número de muestra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Promedio (pg/ml)	53.2	229.1	694.5	31.6	160.6	438.1
Desviación estándar	3.6	13.3	38.4	2.1	8.2	13.6
Coeficiente de variación (%)	6.8	5.8	5.5	6.5	5.1	3.1

Precisión intraensayo (Precisión dentro de un ensayo) Se analizaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.

Precisión entre ensayos (Precisión entre ensayos) Se analizaron tres muestras de concentración conocida seis veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.

La recuperación del pico se evaluó añadiendo 3 niveles de VEGF/VEGFA humano a una muestra de suero humano sano. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.

La recuperación osciló entre el 94% y el 119% con una recuperación media general del 105%.

Matriz de muestra	muestra Evaluado	Rango (pg/ml)	detectable %	Media de detectable (pg/ml)
suero	30	25.21-450.32	100.0	185.52

Suero/Plasma: se evaluaron treinta muestras de voluntarios aparentemente sanos para detectar la presencia de VEGF en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes.