Kit ELISA humano OX40/TNFRSF4

OX40 (CD134; TNFRSF4) es una molécula coestimuladora de células T de la superfamilia de receptores de TNF que coordina con otros coestimuladores unidos a membrana como CD28, CD40, CD30, CD27 y 4-1BB. OX40 se expresa en células T CD4+ vírgenes solo después de la interacción del TCR con células presentadoras de antígeno (APC; células dendríticas y B) y la coestimulación mediante ligando CD40/CD40 y CD28/B7. Es máximo entre 2 y 5 días después de la activación o 4 horas después de la reactivación de las células T de memoria. La OX40 humana es una glicoproteína transmembrana tipo I de 48 kDa con una secuencia señal de 28 aminoácidos (aa), un dominio extracelular (ECD) de 185 aa que tiene cuatro repeticiones TNFR-Cys y una región bisagra O-glicosilada, un segmento transmembrana de 20 aa y un dominio citoplasmático de 41 aa. La ECD del OX40 humano muestra un 71%, 68%, 67%, 64% y 64% de identidad con la ECD del OX40 felino, canino, conejo, ratón y rata, respectivamente. La participación de OX40 en células T CD4+ activadas por el ligando OX40 en células dendríticas activadas promueve la supervivencia y proliferación de células T, prolonga la respuesta inmune y mejora la cantidad de células que realizan la transición de células T efectoras a células T de memoria. La transducción de señales OX40 incluye la unión de factores asociados (TRAF) (receptor de TNF) y la activación de NF kappa B y PI3 quinasa para mejorar la expresión de citocinas, miembros de la familia antiapoptótica Bcl 2, survivina y el receptor de quimiocina CXCR5. CXCR5 promueve la migración de células T a los centros germinales para brindar ayuda a las células B. Los estudios que utilizan ratones knockout o transgénicos y anticuerpos agonistas o bloqueadores muestran que la interacción OX40/OX40L es fundamental para establecer o reactivar las células T de memoria y romper la tolerancia inmune. El bloqueo de la participación de OX40 es eficaz en modelos animales de inflamación alérgica de las vías respiratorias, enfermedad de injerto contra huésped y enfermedad autoinmune.

pg/ml	D.O.		Promedio	Corregido
0.00	0.0168	0.0150	0.0159
12.29	0.0413	0.0360	0.0387	0.0228
30.72	0.0754	0.0717	0.0736	0.0577
76.80	0.1554	0.1469	0.1512	0.1353
192.00	0.3511	0.3457	0.3484	0.3325
480.00	0.8416	0.8055	0.8236	0.8077
1200.00	1.8010	1.8460	1.8235	1.8076
3000.00	3.1860	3.2240	3.2050	3.1891

	Precisión intra-ensayo			Precisión inter-ensayo
Número de muestra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Promedio (pg/ml)	68.3	374.5	1141.6	69.2	348.2	1106.9
Desviación estándar	2.1	23.5	44.4	3.9	12.7	52.2
Coeficiente de variación (%)	3.0	6.3	3.9	5.6	3.7	4.7

Precisión intraensayo (Precisión dentro de un ensayo) Se analizaron tres muestras de concentración conocida veinte veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.
Precisión entre ensayos (Precisión entre ensayos) Se analizaron tres muestras de concentración conocida seis veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.

La recuperación del pico se evaluó añadiendo 3 niveles de OX40/TNFRSF4 humano a una muestra de suero humano sano. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.
La recuperación osciló entre el 93% y el 120% con una recuperación media general del 103%.

Matriz de muestra	Muestra evaluada	Rango (pg/ml)	Detectables (%)	Media de detectables (pg/ml)
suero	30	19,5-94,28	100	59.08

Suero/Plasma: se evaluaron treinta muestras de voluntarios aparentemente sanos para detectar la presencia de OX40/TNFRSF4 en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes.