Par de anticuerpos humanos IL-8 ARExSet® para ELISA

La interleucina-8 (IL-8), también conocida como IL-8, GCP-1 y NAP-1, es un miembro de 8-9 kDa que se une a heparina de la familia de quimiocinas alfa o CXC. Hay al menos 15 miembros de la familia CXC humana que adoptan una estructura de tres hojas beta y una hélice alfa. La mayoría de las quimiocinas CXC muestran un motivo tripéptido N-terminal Glu-Leu-Arg (ELR). IL-8 circula como monómero, homodímero y heterodímero con CXCL4/PF4. El monómero se considera el más bioactivo, mientras que el heterodímero puede potenciar la actividad del PF4. La oligomerización de IL-8 está modulada por sus interacciones con los glucosaminoglicanos (GAG) de la matriz y la superficie celular. La IL-8 humana madura comparte un 65-69% de identidad de aminoácidos (aa) con la IL-8 canina, felina y porcina. No existe ningún homólogo del gen IL-8 en roedores.

Se generan múltiples isoformas de IL-8 mediante corte y empalme alternativo y escisión proteolítica diferencial. En los seres humanos, el empalme alternativo genera una isoforma con una sustitución de once aa en el extremo C. El procesamiento proteolítico da como resultado el truncamiento N-terminal de IL-8 y es probable que sea un evento específico de la célula. Por ejemplo, los fibroblastos y las células endoteliales generan la forma 1-77 escindiendo IL-8 siguiendo a Glu21, mientras que los monocitos y linfocitos generan la forma 6-77 escindiendo siguiendo a Leu25. Estas formas truncadas generalmente muestran una mayor bioactividad, particularmente a través del receptor CXCR1. La IL-8 también puede sufrir citrulinación en Arg27 del precursor, una modificación que aumenta su vida media y su capacidad para inducir leucocitosis. Una amplia variedad de células secretan IL-8, incluidos monocitos y neutrófilos, fibroblastos y queratinocitos, mastocitos, células del músculo liso visceral, células dendríticas, células alveolares grandes tipo II y células endoteliales.

La bioactividad de IL-8 está mediada por dos receptores acoplados a proteína G, denominados CXCR1/IL-8 RA y CXCR2/IL-8 RB. CXCR1 tiene un tamaño de 45-50 kDa y lo utiliza casi exclusivamente IL-8. CXCR2 tiene un tamaño de 35-40 kDa y lo utilizan casi todas las quimiocinas CXC. Tanto CXCR1 como CXCR2 se asocian constitutivamente en homodímeros funcionales. También pueden heterodimerizarse, pero estos complejos se disocian después de la unión de IL-8. CXCR2 responde a concentraciones bajas de IL-8 y se asocia principalmente con quimiotaxis y liberación de MMP-9. CXCR1, por el contrario, responde a altas concentraciones de IL-8 y se asocia con el estallido respiratorio y la activación de la fosfolipasa D2. Por lo tanto, la ligadura de CXCR2 induce la adhesión de leucocitos al endotelio vascular activado y la migración a sitios de inflamación, mientras que la ligadura de CXCR1 activa la actividad antimicrobiana de los neutrófilos. IL-8 también puede formar un complejo con Serpin A1/alfa-1 antitripsina, y esto previene la interacción de IL-8 con CXCR1.

Además de sus efectos proinflamatorios, la IL-8 participa en la angiogénesis y la patogénesis de la aterosclerosis y el cáncer. Induce la expresión de VEGF en células endoteliales vasculares y funciona como un factor autocrino para el crecimiento y la angiogénesis de las CE. Está regulado positivamente en las lesiones ateroscleróticas y elevado en el suero y el líquido cefalorraquídeo después de un infarto de miocardio. En el cáncer, la IL-8 promueve la transición epitelial-mesenquimatosa, así como la invasividad y metástasis de las células tumorales.

• Los emparejamientos de anticuerpos de captura y detección optimizados con las concentraciones recomendadas ahorran un largo tiempo de desarrollo
• Se proporcionan protocolos de desarrollo para guiar una mayor optimización del ensayo.

• Alternativa económica a los kits completos

• Captura de anticuerpos
• Anticuerpo de detección
• Estándar recombinante
• Estreptavidina conjugada con peroxidasa de rábano picante (estreptavidina-HRP)

1. Conjunto AREx^® Kit de reactivos auxiliares (5 placas): que contiene microplacas de 96 pocillos, selladores de placas, solución de sustrato, solución de parada, tampón de recubrimiento de placas (PBS), tampón de lavado y tampón de ensayo.
   
   1. Microplacas de 96 pocillos:AREX Biosciences, catálogo n.° DSEP01. Selladores de placas: AREX Biosciences, n.º de catálogo DSSF01.
   2. Tampón de recubrimiento:NaCl 137 mM, KCl 2,7 mM, Na2HPO4 8,1 mM, KH2PO4 1,5 mM, pH 7,2-7,4, fi 0,2 μm
      filtrado. AREX Biosciences, catálogo n.º DSCB01.
   3. Búfer de bloqueo: AREX Biociencias, N.º de catálogo DSBB01.
   4. Tampón de lavado:Tween 20 al 0,05% en PBS, pH 7,2-7,4. AREX Biosciences, catálogo n.º DSWB01.
   5. Tampón de ensayo:0,5% BSA, 0,05% Tween20, solución PBS. AREX Biosciences, n.º de catálogo DSAB01
      Solución de sustrato:Tetrametilbencidina. AREX Biosciences, catálogo n.º DSTS01.
   6. Detener solución:0,5 mol/ml H2SO4. AREX Biosciences, catálogo n.º DSSS01.