Kit ELISA CTLA-4 humano
CAT.NO. : AEH0179
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Antecedentes
CTLA-4 (linfocito T citotóxico-4, denominado CD152), es una molécula inhibidora de células T transmembrana de tipo I que es miembro de la superfamilia Ig. El ADNc CTLA-4 humano o de ratón codifica 223 aminoácidos (aa), incluida una secuencia señal de 35 aa, un dominio extracelular (ECD) de 126 aa con un dominio tipo V similar a Ig, una secuencia transmembrana (TM) de 21 aa y una secuencia citoplasmática de 41 aa. Se encuentra como un homodímero covalente de 41 a 43 kDa. Dentro del ECD, el CTLA-4 humano comparte un 68%, un 71% y un 83‑86% de identidad de secuencia aa con el CTLA-4 de ratón, rata y porcino/bovino/conejo/felino/canino, respectivamente. Posiblemente se secrete una forma de 174 aa que carece de TM y secuencias citoplasmáticas (sCTLA-4). Se informan isoformas de 56‑79 aa que contienen principalmente partes del dominio citoplasmático. En el ratón, una isoforma que carece del dominio similar a Ig tiene actividad inhibidora independiente del ligando y se denomina liCTLA-4. CD28, que está estructuralmente relacionado con CTLA-4, se expresa constitutivamente en células T vírgenes y promueve la activación de células T cuando se activa con B7-2 en células presentadoras de antígeno (APC) dentro de la sinapsis inmunológica (IS). Por el contrario, CTLA-4 se recluta desde vesículas intracelulares hacia el IS comenzando 1 o 2 días después de la activación de las células T. Forma una red lineal con B7-1 en APC, lo que induce señales reguladoras negativas y finaliza la activación de las células T. Abatacept, una proteína de fusión terapéutica CTLA-4-Ig humana (nombre comercial Orencia), compite con CD28 por la unión de B7-1 y B7-2 y se ha utilizado para antagonizar la activación de células T en condiciones autoinmunes y para mejorar la supervivencia de trasplantes. Los ratones a los que se les ha eliminado CTLA-4 no muestran anomalías hasta después del nacimiento, pero luego desarrollan reacciones autoinmunes letales debido a la activación continua de las células T y al control deficiente por parte de las células T reguladoras, que expresan constitutivamente CTLA-4 en ratones y humanos de tipo salvaje.
Datos típicos
|
pg/ml |
D.O. |
Promedio |
Corregido |
|
|
0.00 |
0.0105 |
0.0103 |
0.0104 |
|
|
2.74 |
0.0171 |
0.0159 |
0.0165 |
0.0061 |
|
8.23 |
0.0282 |
0.0271 |
0.0277 |
0.0173 |
|
24.69 |
0.0616 |
0.0611 |
0.0614 |
0.0510 |
|
74.07 |
0.1683 |
0.1480 |
0.1582 |
0.1478 |
|
222.22 |
0.5143 |
0.4790 |
0.4967 |
0.4863 |
|
666.67 |
1.5540 |
1.5790 |
1.5665 |
1.5561 |
|
2000.00 |
3.9590 |
3.9100 |
3.9345 |
3.9241 |
Precisión
|
Precisión intra-ensayo |
Precisión inter-ensayo |
|||||
|
Número de muestra |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Promedio (pg/ml) |
53.1 |
266.2 |
814.9 |
17.2 |
77.5 |
231.4 |
|
Desviación estándar |
2.9 |
9.1 |
34.8 |
1.3 |
5.1 |
12.0 |
|
Coeficiente de variación (%) |
5.5 |
3.4 |
4.3 |
7.8 |
6.6 |
5.2 |
Precisión entre ensayos (Precisión entre ensayos) Se analizaron tres muestras de concentración conocida seis veces en una placa para evaluar la precisión intraensayo.
Recuperación de picos
La recuperación del pico se evaluó añadiendo 3 niveles de CTLA-4 humano a una muestra de suero humano sano. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.
La recuperación osciló entre el 91% y el 97% con una recuperación media general del 94%.
La recuperación osciló entre el 91% y el 97% con una recuperación media general del 94%.
Valores de muestra
| Matriz de muestra | Muestra evaluada | Rango (pg/ml) | Detectables (%) | Media de detectables (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| suero | 30 | 0,31-3,78 | 100 | 1.11 |
Suero/plasma: se evaluaron treinta muestras de voluntarios aparentemente sanos para detectar la presencia de CTLA-4 en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes.
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