Kit ELISA CD28 humano
CAT.NO. : AEH0183
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Antecedentes
CD28 y CTLA-4, junto con sus ligandos, B7-1 y B7-2, constituyen una de las vías coestimuladoras dominantes que regulan las respuestas de las células T y B. CD28 y CTLA-4 son moléculas estructuralmente homólogas que son miembros de la superfamilia de genes de inmunoglobulina (Ig). Tanto CD28 como CTLA-4 están compuestos por una única Ig
Dominio extracelular tipo V, un dominio transmembrana y un dominio intracelular. CD28 y CTLA-4 se expresan ambos en la superficie celular como homodímeros unidos por disulfuro o como monómeros. Los genes que codifican estas dos moléculas están estrechamente vinculados en el cromosoma 2 humano y en el cromosoma 1 de ratón. El CD28 de ratón se expresa de forma constitutiva en prácticamente el 100% de las células T de ratón y en los timocitos en desarrollo. La expresión en la superficie celular de CD28 de ratón está regulada negativamente tras la ligación de CD28 en presencia de PMA o PHA. Por el contrario, CTLA-4 no se expresa constitutivamente pero se regula rápidamente después de la activación de las células T y la ligadura de CD28. La expresión en la superficie celular de CTLA-4 de ratón alcanza su punto máximo aproximadamente 48 horas después de la activación. Aunque tanto CTLA-4 como CD28 pueden unirse a los mismos ligandos, CTLA-4 se une a B7-1 y B7-2 con una afinidad 20-100 veces mayor que CD28. Se ha demostrado que la interacción CD28/B7 previene la apoptosis de células T activadas mediante la regulación positiva de Bcl-xL. También se ha demostrado que la ligadura de CD28 regula la diferenciación Th1/Th2.
Dominio extracelular tipo V, un dominio transmembrana y un dominio intracelular. CD28 y CTLA-4 se expresan ambos en la superficie celular como homodímeros unidos por disulfuro o como monómeros. Los genes que codifican estas dos moléculas están estrechamente vinculados en el cromosoma 2 humano y en el cromosoma 1 de ratón. El CD28 de ratón se expresa de forma constitutiva en prácticamente el 100% de las células T de ratón y en los timocitos en desarrollo. La expresión en la superficie celular de CD28 de ratón está regulada negativamente tras la ligación de CD28 en presencia de PMA o PHA. Por el contrario, CTLA-4 no se expresa constitutivamente pero se regula rápidamente después de la activación de las células T y la ligadura de CD28. La expresión en la superficie celular de CTLA-4 de ratón alcanza su punto máximo aproximadamente 48 horas después de la activación. Aunque tanto CTLA-4 como CD28 pueden unirse a los mismos ligandos, CTLA-4 se une a B7-1 y B7-2 con una afinidad 20-100 veces mayor que CD28. Se ha demostrado que la interacción CD28/B7 previene la apoptosis de células T activadas mediante la regulación positiva de Bcl-xL. También se ha demostrado que la ligadura de CD28 regula la diferenciación Th1/Th2.
Datos típicos
|
pg/ml |
D.O. |
Promedio |
Corregido |
|
|
0.00 |
0.0102 |
0.0092 |
0.0097 |
|
|
156.25 |
0.0309 |
0.0313 |
0.0311 |
0.0214 |
|
312.50 |
0.0496 |
0.0578 |
0.0537 |
0.0440 |
|
625.00 |
0.0966 |
0.1092 |
0.1029 |
0.0932 |
|
1250.00 |
0.2040 |
0.2336 |
0.2188 |
0.2091 |
|
2500.00 |
0.5139 |
0.5597 |
0.5368 |
0.5271 |
|
5000.00 |
1.3250 |
1.5090 |
1.4170 |
1.4073 |
|
10000.00 |
3.3340 |
3.5900 |
3.4620 |
3.4523 |
Precisión
|
Precisión intra-ensayo |
Precisión inter-ensayo |
|||||
|
Número de muestra |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Promedio (pg/ml) |
203.4 |
1052.0 |
3276.1 |
166.4 |
957.1 |
3088.7 |
|
Desviación estándar |
11.5 |
37.4 |
176.2 |
3.5 |
29.7 |
91.4 |
|
Coeficiente de variación (%) |
5.6 |
3.6 |
5.4 |
2.1 |
3.1 |
3.0 |
pico re
La recuperación del pico se evaluó añadiendo 3 niveles de CD28 humano a una muestra de suero humano sano. El suero no enriquecido se utilizó como blanco en este experimento.
La recuperación osciló entre el 85% y el 113% con una recuperación media general del 103%.
La recuperación osciló entre el 85% y el 113% con una recuperación media general del 103%.
Valores de muestra
| Matriz de muestra | Muestra evaluada | Rango (pg/ml) | Detectables (%) | Media de detectables (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| suero | 30 | 3,32-816,93 | 100 | 104.41 |
Suero/Plasma: se evaluaron treinta muestras de voluntarios aparentemente sanos para detectar la presencia de CD28 en este ensayo. No se disponía de antecedentes médicos de los donantes.
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