Anticuerpo monoclonal de conejo ERK1 (ARA780)

Características y detalles clave

  • Objetivo: ERK1
  • Fuente/Anfitrión: Conejo
  • Reactividad: Humano, Ratón, Rata
  • Clonalidad: monoclonal
  • Aplicaciones: BM, IHC, IF/ICC, FC, IP
  • Conjugación: Sin conjugar
  • Almacenamiento: a-20°C
  • Marca:
CAT.NO. : ARA6567
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Detalles del producto
Antecedentes
Anticuerpo monoclonal de conejo recombinante ERK1 Hoja de datos del producto Peso molecular previsto: 43 kDa Pureza: IgG purificada por afinidad ProA Reactividad cruzada de especies: Ratón humano Forma de rata: Líquido Reactividad cruzada de especies determinada por WB Swissprot ID: P27361 Aplicaciones: WB IHC IF/ICC FC IP Antecedentes: ERK1 y ERK2 pertenecen a la superfamilia de proteínas quinasas. Participa tanto en el inicio como en la regulación de la meiosis, la mitosis y las funciones posmitóticas en células diferenciadas mediante la fosforilación de un entumecido.
Solicitud
Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB

1:2000-1:10000

IHC

1:100-1:200

FI/CCI

1:50-1:200

FC

1:200-1:1000

IP

1:50

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.
Descripción general

Descripción

Anticuerpo monoclonal de conejo contra ERK1

Tipo de anticuerpo

Anticuerpo primario

MW previstos

43kDa

inmunógeno

Como inmunógeno se utilizó un péptido sintético correspondiente al término N- de ERK1.

Purificación

IgG purificada por afinidad ProA

Formulario/búfer

PBS 59%, Azida de sodio 0,01%, Glicerol 40%, BSA 0,55%.

Nombres alternativos

ERK1; PRKM3; Mitógeno-proteína quinasa 3 activada; MAP quinasa 3; MAPK 3; ERT2; Señal extracelular-quinasa regulada 1; ERK-1; Insulina-quinasa MAP2 estimulada; isoforma p44 de MAP quinasa; p44-MAPA; Microtúbulos-proteína 2 quinasa asociada; p44-ERK1

Símbolo genético

MAPK3

Entrez Gene

5595 (humano)

Swissprot

P27361

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.
Datos

Todos los carriles: Anticuerpo anti-ERK1 en dilución 1:2000

MW previsto: 43 kDa

MW observado: 44 kDa



Carril 1: Hela

Carril 2: 293T

Carril 3: Raw264.7

Carril 4: A431

Carril 5: A375



Lisado a 10 µg por carril

2do Ab:

GAR HRP(H+L) 1:5.000

Exposición: años 50

Todos los carriles: Anticuerpo anti-ERK1 en dilución 1:2000

MW previsto: 43 kDa

MW observado: 44 kDa



Carril 1: Cerebro Mu

Carril 2: Mu Riñón

Carril 3: Hígado Mu

Carril 4: Cerebro de rata

Carril 5: Riñón de rata



Lisado a 10 µg por carril

2do Ab:

GAR HRP(H+L) 1:5.000

Exposición: 20s

Análisis de inmunohistoquímica (formalina/PFA-parafina fijada-secciones incluidas) Marcado de tejido de cáncer de cuello uterino ERK1 con ARA780 a 1:200. La recuperación de antígeno mediada por calor se realizó utilizando tampón Tris/EDTA pH 9,0.

Tinción de ARA780 con ERK1 en células Hela mediante IF/ICC (inmunofluorescencia/inmunocitoquímica). Las células se fijaron con paraformaldehído, se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% y se bloquearon con suero de cabra al 10% durante media hora a temperatura ambiente. Las muestras se incubaron con anticuerpo primario (1:50) a 4°C. Se utilizó un policlonal IgG de cabra anticonejo conjugado con Alexa Fluor® 488 como anticuerpo secundario (1:500). Se utilizó DAPI (azul) como contratinción nuclear.



Control: PBS y anticuerpo secundario, An Alexa Fluor® 488-IgG de cabra anti-conejo conjugada (1:500).

Histograma superpuesto que muestra células Hela teñidas con ARA780 (rojo). Las células se fijaron con paraformaldehído al 4% (10 min) y luego se permeabilizaron con TritonX-100 al 0,1% durante 15 min. Luego, las células se incubaron en el anticuerpo (ARA780, dilución 1:1000) en 1x PBS/BSA al 1% durante 30 minutos a temperatura ambiente. El anticuerpo secundario utilizado fue un Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) a una dilución 1:2000 durante 20 min a temperatura ambiente. Se utilizó como control una muestra sin etiquetar (negra).

ERK1 se inmunoprecipitó a partir de 0,4 mg de lisado de células completas A375 con ARA780 a una dilución de 1:50.
2do Ab:

GAR HRP para IP 1:500



Carril 1: IP de ARA780 en lisado de células completas A375

Carril 2: PBS en lugar de ARA780 en lisado de células completas A375

Carril 3: lisado de células completas A375, 10 µg (entrada)



Exposición: 120s

Almacenamiento
Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.
Nota
Sólo para uso en investigación. No apto para uso diagnóstico, terapéutico, profiláctico o in vivo.
Preguntas frecuentes
¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?
Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.
¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?
Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.
¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?
Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.
¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?
La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.
¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?
Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.
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