ADN-Anticuerpo monoclonal de ratón PKcs(C3467)

Características y detalles clave

Anticuerpo monoclonal de ratón contra el ADN-PKcs
  • Objetivo: ADN-PKcs
  • Fuente/Anfitrión: ratón
  • Reactividad: humano
  • Clonalidad: monoclonal
  • Aplicaciones: BM, IHC, FI/ICC, IP
  • Conjugación: Sin conjugar
  • Almacenamiento: a-20°C
  • Marca:
CAT.NO. : AMA03079
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Tamaño:
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Detalles del producto
Antecedentes
Serina/treonina (proteína quinasa que actúa como sensor molecular del daño del ADN). Participa en la unión de extremos no homólogos (NHEJ) del ADN necesaria para la reparación de roturas de doble hebra (DSB) y la recombinación V(D)J. Debe estar unido al ADN para expresar sus propiedades catalíticas. Promueve el procesamiento de estructuras de ADN en horquilla en la recombinación V(D)J mediante la activación de la endonucleasa artemisa en horquilla (DCLRE1C). Reclutado por XRCC5 y XRCC6 en los extremos del ADN y es necesario para (1) proteger y alinear los extremos rotos del ADN, evitando así su degradación, (2) y secuestrar el DSB para su reparación por parte del NHEJ. Actúa como una proteína de andamio para ayudar a la localización de las proteínas reparadoras del ADN en el sitio del daño. El ensamblaje del complejo ADN-PK en los extremos del ADN también es necesario para el paso de ligadura NHEJ.
Solicitud
Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB

1:500 - 1:1000

IHC

1:50 - 1:100

FI/CCI

1:50 - 1:100

IP

1:10 - 1:50

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.
Descripción general

Descripción

Anticuerpo monoclonal de ratón contra el ADN-PKcs

Especificidad

Reconoce niveles endógenos de proteína ADN-PKcs.

Tipo de anticuerpo

Anticuerpo primario

Inmunógeno

Fragmentos de proteína PKcs de ADN humano recombinante purificado expresados ​​en E. coli

Purificación

El anticuerpo se purificó mediante cromatografía de afinidad de inmunógeno.

Peso Molecular

Previsto: 469 kD; Observado: 450 kD

Formulario/búfer

Líquido en PBS que contiene 50% de glicerol, 0,5% de BSA y 0,02% de azida sódica, pH 7,3.

Nombres alternativos

HYRC; HYRC1; subunidad catalítica de proteína quinasa dependiente de ADN; ADN-subunidad catalítica PK; ADN-PKcs; DNPK1; p460

Símbolo genético

PRKDC

Entrez Gene

5591 (humano)

SwissProt

P78527 (humano)

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.
Datos

Análisis de transferencia Western de la expresión de ADN-PKcs en lisados ​​de células completas Hela (A), K562 (B). (Tamaño de banda previsto: 469 kD; Tamaño de banda observado: 450 kD)

Análisis inmunohistoquímico de la tinción de ADN - PKcs en una sección de tejido incluido en parafina y fijado con formalina de carcinoma de mama humano. La sección se trató previamente utilizando recuperación de antígeno mediada por calor con tampón citrato de sodio (pH 6,0). Luego, la sección se incubó con el anticuerpo a temperatura ambiente y se detectó usando un sistema de polímero compacto conjugado con HRP. Se utilizó DAB como cromógeno. Luego, la sección se contratiñó con hematoxilina y se montó con DPX.

Análisis inmunofluorescente de tinción de ADN-PKcs en células HeLa. Las células fijadas con formalina se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% en TBS durante 5-10 minutos y se bloquearon con BSA-PBS al 3% durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las células se sondaron con el anticuerpo primario en BSA al 3% - PBS y se incubaron durante la noche a 4 ° C en una cámara hidificada. Las células se lavaron con PBST y se incubaron con un anticuerpo secundario conjugado AREX® Fluor 488 (verde) en PBS a temperatura ambiente en la oscuridad.

Almacenamiento
Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.
Nota
Sólo para uso en investigación. No apto para uso en procedimientos de diagnóstico.
Preguntas frecuentes
¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?
Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.
¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?
Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.
¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?
Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.
¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?
La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.
¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?
Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.
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