Anticuerpo policlonal de conejo beta-catenina (fosfo-S33)

Características y detalles clave

Anticuerpo policlonal de conejo contra Beta-catenina (Phospho-S33)
  • Objetivo: Beta-catenina (Fosfo-S33)
  • Fuente/Anfitrión: Conejo
  • Reactividad: humano, ratón, rata, bovino, perro, cerdo, conejo, oveja
  • Clonalidad: policlonal
  • Aplicaciones: BM, CHI, FI/CCI
  • Conjugación: Sin conjugar
  • Almacenamiento: a-20°C
  • Marca:
CAT.NO. : APA09208
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Tamaño:
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Detalles del producto
Antecedentes
"Componente clave aguas abajo de la vía de señalización Wnt canónica". En ausencia de Wnt, forma un complejo con AXIN1, AXIN2, APC, CSNK1A1 y GSK3B que promueve la fosforilación en los residuos N-terminales Ser y Thr y la ubiquitinación de CTNNB1 a través de BTRC y su posterior degradación por el proteosoma. En presencia del ligando Wnt, CTNNB1 no está ubiquitinado y se acumula en el núcleo, donde actúa como coactivador de factores de transcripción de la familia TCF/LEF, lo que lleva a activar genes que responden a Wnt. También actúa como coactivador de otros factores de transcripción, como NR5A2. "Promueve la transición epitelial a mesenquimatosa/transición mesenquimatosa a epitelial (EMT/MET) mediante la activación de la transcripción de genes objetivo (CTNNB1/TCF)".
Solicitud
Para garantizar un rendimiento óptimo del ensayo, AREX recomienda realizar una titulación de reactivos adaptada a cada sistema de prueba para obtener resultados de detección óptimos.

WB

1:500 - 1:1000

IHC

1:100 - 1:200

FI/CCI

1:100 - 1:500

*Los resultados son específicos de la muestra. Consulte las condiciones de ensayo y los parámetros de prueba locales como referencia.
Descripción general

Descripción

Anticuerpo policlonal de conejo contra Beta-catenina (Phospho-S33)

Especificidad

Reconoce niveles endógenos de proteína Beta-catenina sólo cuando está fosforilada en S33.

Tipo de anticuerpo

Anticuerpo primario

Inmunógeno

Fosfopéptido sintético conjugado con KLH correspondiente a los residuos que rodean S33 de la proteína catenina Beta humana. La secuencia exacta es propietaria.

Purificación

El anticuerpo se purificó mediante cromatografía de afinidad de inmunógeno.

Peso Molecular

Previsto: 85 kD; Observado: 86 kD

Formulario/búfer

Líquido en 0,42% de fosfato de potasio, 0,87% de cloruro de sodio, pH 7,3, 30% de glicerol y 0,01% de azida de sodio.

Nombres alternativos

CTNB; Catenina beta-1; Beta-catenina

Símbolo genético

CTNNB1

Entrez Gene

1499 (humano); 12387 (ratón); 84353 (Rata)

SwissProt

P35222 (Humano); Q02248(Ratón); Q9WU82 (Rata)

*AREX optimiza continuamente nuestros productos. Es posible que el contenido de la página web no refleje las últimas actualizaciones. Para consultas, comuníquese con info@arexbio.com o su distribuidor local.
*El número de clon, la reactividad, la fuente/host y la clonalidad se pueden encontrar en la sección de características clave y nombre del producto anterior.
Datos

Análisis de transferencia Western de la expresión de Beta-catenina (Phospho-S33) en lisados ​​de células completas HeLa (A), HepG2 (B). (Tamaño de banda previsto: 85 kD; Tamaño de banda observado: 86 kD)

Análisis inmunohistoquímico de la tinción con beta-catenina (fosfo-S33) en una sección de tejido incluido en parafina fijado con formalina y cáncer de mama humano. La sección se trató previamente utilizando recuperación de antígeno mediada por calor con tampón citrato de sodio (pH 6,0). Luego, la sección se incubó con el anticuerpo a temperatura ambiente y se detectó usando un sistema de polímero compacto conjugado con HRP. Se utilizó DAB como cromógeno. Luego, la sección se contratiñó con hematoxilina y se montó con DPX.

Análisis inmunofluorescente de tinción con Beta-catenina (Phospho-S33) en células HepG2. Las células fijadas con formalina se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% en TBS durante 5-10 minutos y se bloquearon con BSA-PBS al 3% durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las células se sondaron con el anticuerpo primario en BSA al 3% - PBS y se incubaron durante la noche a 4 ° C en una cámara hidificada. Las células se lavaron con PBST y se incubaron con un anticuerpo secundario conjugado DyLight 594 (rojo) en PBS a temperatura ambiente en la oscuridad. Se utilizó DAPI para teñir los núcleos celulares (azul).

Almacenamiento
Almacenar a 4°C por corto tiempo. Para almacenamiento a largo plazo, almacenar a -20°C, evitando ciclos de congelación/descongelación.
Nota
Sólo para uso en investigación. No apto para uso en procedimientos de diagnóstico.
Preguntas frecuentes
¿Cuáles son los principales tipos de anticuerpos de investigación y en qué se diferencian?
Los anticuerpos de investigación se dividen principalmente en anticuerpos monoclonales y anticuerpos policlonales. Los anticuerpos monoclonales suelen ofrecer una mayor especificidad y una mejor consistencia entre lotes, mientras que los anticuerpos policlonales suelen proporcionar una afinidad más fuerte, pero pueden mostrar más variación entre lotes. La elección depende de sus necesidades experimentales específicas.
¿Cómo puedo saber si un anticuerpo de investigación es adecuado para mi experimento?
Se recomienda revisar cuidadosamente la hoja de datos del producto para conocer las aplicaciones validadas, la reactividad de las especies, las diluciones recomendadas y las referencias publicadas. Para anticuerpos nuevos, suele ser útil realizar una validación a pequeña escala con muestras de control positivas.
¿Puede el almacenamiento inadecuado de anticuerpos de investigación afectar los resultados experimentales?
Sí. Los anticuerpos son sensibles a la temperatura, a los ciclos repetidos de congelación/descongelación y a la contaminación. El almacenamiento inadecuado puede provocar una reducción de la actividad, un aumento del fondo o señales más débiles. Lo mejor es seguir las instrucciones de almacenamiento proporcionadas en la ficha técnica del producto.
¿Por qué la dilución recomendada en la hoja de datos no funciona bien en mi experimento?
La dilución recomendada se basa en las condiciones de prueba del proveedor. Factores como el tipo de muestra, el método de fijación y el sistema de detección de su laboratorio pueden influir en la concentración de trabajo óptima. A menudo es necesario realizar una optimización de la serie de dilución en su propio sistema.
¿Qué precauciones debo tomar al utilizar por primera vez un anticuerpo de investigación recién adquirido?
Es aconsejable centrifugar brevemente el anticuerpo (especialmente los concentrados o liofilizados) y luego realizar un experimento piloto a pequeña escala utilizando las condiciones recomendadas. Registrar el número de lote y la fecha de uso también es útil para un seguimiento futuro.
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