p21 (Phospho-T145) Polyklonaler Kaninchen-Antikörper

Datenblatt

Sicherheitsdatenblatt

p21 (Phospho-T145) Rabbit Polyclonal Antibody

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen p21 (Phospho-T145)

Ziel: S. 21 (Phospho-T145)
Quelle/Host: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Rind, Hund, Schaf
Klonalität: Polyklonal
Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
Konjugation: Unkonjugiert
Lagerung: bei -20°C

Marke:

KAT.-NR. : APA09170

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL 100 μL

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Produktdetails

Hintergrund

Spielt eine wichtige Rolle bei der Kontrolle des Zellzyklusverlaufs und des durch DNA-Schäden verursachten G2-Stillstands. Beteiligt an der durch p53/TP53 vermittelten Hemmung der Zellproliferation als Reaktion auf DNA-Schäden. Auch am durch CREB3L1 vermittelten p53-unabhängigen DNA-Schaden-induzierten G2-Stillstand in Astrozyten und Osteoblasten beteiligt. Bindet an die Cyclin-abhängige Kinase-Aktivität und hemmt diese, verhindert die Phosphorylierung kritischer Cyclin-abhängiger Kinase-Substrate und blockiert das Fortschreiten des Zellzyklus. Funktioniert bei der Lokalisierung und dem Aufbau des Cyclin D-CDK4-Komplexes im Zellkern und fördert dessen Kinaseaktivität gegenüber RB1. Hemmt bei höheren stöchiometrischen Verhältnissen die Kinaseaktivität des Cyclin D-CDK4-Komplexes. Hemmt die DNA-Synthese durch DNA-Polymerase-Delta, indem es mit POLD3 um die PCNA-Bindung konkurriert.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:100 - 1:200
IF/ICC	1:100 - 1:500

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Beschreibung	Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen p21 (Phospho-T145)
Spezifität	Erkennt endogene Mengen an p21-Protein nur, wenn es bei T145 phosphoryliert ist.
Antikörpertyp	Primärer Antikörper
Immunogen	KLH-konjugiertes synthetisches Phosphopeptid, das den Resten entspricht, die T145 des menschlichen p21-Proteins umgeben. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.
Reinigung	Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.
Molekulargewicht	Voraussichtlich: 18 kD; Beobachtet: 21 kD
Form/Puffer	Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.
Alternative Namen	CAP20; CDKN1; CIP1; MDA6; PIC1; SDI1; WAF1; Cyclin-abhängiger Kinase-Inhibitor 1; CDK-interagierendes Protein 1; Melanomdifferenzierung - assoziiertes Protein 6; MDA-6; S. 21
Gensymbol	CDKN1A
Entrez Gene	1026 (Mensch)
SwissProt	P38936 (Mensch)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Western-Blot-Analyse der p21 (Phospho-T145)-Expression in mit HT1080 EGF behandelten (A) und HeLa EGF behandelten (B) Ganzzelllysaten. (Vorhergesagte Bandengröße: 18 kD; beobachtete Bandengröße: 21 kD)

Immunhistochemische Analyse der p21 (Phospho-T145)-Färbung in formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten von menschlichem Prostatakrebs. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der p21 (Phospho-T145)-Färbung in HeLa-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS für 5-10 Minuten permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS für 30 Minuten bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem DyLight 594-konjugierten Sekundärantikörper (rot) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert.

Direkte ELISA-Antikörperdosis-Wirkungskurve unter Verwendung des Anti-p21 (Phospho-T145)-Antikörpers. Die Konzentration des Antigens (Phosphopeptid und Nicht-Phosphopeptid) beträgt 5 ug/ml. Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG (H&L) - HRP wurde als sekundärer Antikörper verwendet und das Signal wurde durch das TMB-Substrat entwickelt.

Lagerung

Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische, therapeutische, prophylaktische oder in vivo-Anwendungen.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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