ARExVisual® DAB Chromogen (20×)
KAT.-NR. : ARB0002
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Hintergrund
3,3'-Diaminobenzidin (DAB) ist ein häufig verwendetes Chromogen für die immunhistochemische Färbung. In Gegenwart des Peroxidase-Enzyms erzeugt DAB einen braunen Niederschlag, der in Alkohol unlöslich ist. Dieses Kit kann eine empfindlichere und dunklere DAB-Färbung mit besserem Kontrast zwischen der Chromogen- und Hämatoxylin-Gegenfärbung erzeugen. Die Standard-Arbeitsverdünnung beträgt 50 μl DAB-Chromogen pro 1 ml DAB-Puffer, das Verhältnis kann jedoch nach Wunsch angepasst werden. Eine höhere Empfindlichkeit kann durch die Verwendung von mehr DAB-Chromogen im Vergleich zu DAB-Puffer erreicht werden. Das maximale DAB-Chromogen kann mit 70 μl in 1 ml DAB-Puffer verwendet werden.
Bewerbung
Immunhistochemie für gefrorenes und paraffineingebettetes Gewebe.
Verwendungszweck
Dieses DAB-Chromogen erzeugt bei Reaktion mit Peroxidase an der Stelle des Zielantigens eine braun gefärbte Ablagerung. Es eignet sich zur Verwendung in Peroxidase - basierte immunhistochemische Färbemethoden.
Lagerung und Stabilität
Bei 2 - speichern 8°C. Nicht einfrieren. Zurück zu 2 - 8°C unmittelbar nach Gebrauch. Lagern oder färben Sie nicht unter starker Lichteinstrahlung, beispielsweise direktem Sonnenlicht. Überprüfen Sie das Verfallsdatum auf der Flasche. Verwenden Sie die Reagenzien nicht, wenn das auf dem Etikett angegebene Verfallsdatum überschritten ist. Nicht verwenden, wenn die Reagenzien trüb werden. Mischen Sie nicht die Reagenzien verschiedener Chargen.
Bereiten Sie eine DAB-Arbeitslösung vor
Geben Sie einen Tropfen oder 50 μl DAB-Chromogen (20-fach konzentriert) in 1 ml DAB-Puffer (1-fach). Der Benutzer kann eine beliebige Menge DAB-Arbeitslösung im gleichen Verhältnis (1:20) herstellen. Innerhalb von 2 Stunden nach der Zubereitung verbrauchen. Die maximale Empfindlichkeit kann erreicht werden, wenn 80 μl DAB-Chromogen mit 1 ml Puffer verwendet werden.
Tragen Sie ausreichend DAB-Arbeitslösung auf, um die Probe vollständig zu bedecken. Inkubieren 5 - 10 Minuten. Beobachten Sie die Farbentwicklung unter einem Lichtmikroskop. Spülen Sie die Objektträger vorsichtig mit destilliertem Wasser ab. Gegenfärben, klarmachen und in einem geeigneten Eindeckmedium montieren.
Tragen Sie ausreichend DAB-Arbeitslösung auf, um die Probe vollständig zu bedecken. Inkubieren 5 - 10 Minuten. Beobachten Sie die Farbentwicklung unter einem Lichtmikroskop. Spülen Sie die Objektträger vorsichtig mit destilliertem Wasser ab. Gegenfärben, klarmachen und in einem geeigneten Eindeckmedium montieren.
Notizen
1.DAB-Arbeitslösung ist leicht - empfindlich. Bevor Sie die DAB-Arbeitslösung auf das Gewebe auftragen, bewahren Sie diese bitte im Dunkeln auf. Für die Farbentwicklung die Probe vor starkem Licht geschützt, vorzugsweise im Dunkeln, inkubieren.
2. Hämoglobin, Myoglobin, Cytochrom, Katalase, Neutrophile, Monozyten und Eosinophile können endogene Peroxidase- oder Pseudoperoxidase-Aktivität enthalten, die zu falschen Ergebnissen führen kann positive Ergebnisse. Selbst bei Behandlung mit Peroxidase-Blockierungsreagenz bleibt der rötliche - Braune Pigmente von Bemoproteinen können noch vorhanden sein. Für die korrekte Interpretation jedes Satzes von Probenfärbeergebnissen werden Kontrollobjektträger benötigt: positive Gewebekontrolle, negative Gewebekontrolle und negative Reagenzkontrolle (Objektträger, behandelt mit Isotypkontrolle anstelle des primären Antikörpers).
2. Hämoglobin, Myoglobin, Cytochrom, Katalase, Neutrophile, Monozyten und Eosinophile können endogene Peroxidase- oder Pseudoperoxidase-Aktivität enthalten, die zu falschen Ergebnissen führen kann positive Ergebnisse. Selbst bei Behandlung mit Peroxidase-Blockierungsreagenz bleibt der rötliche - Braune Pigmente von Bemoproteinen können noch vorhanden sein. Für die korrekte Interpretation jedes Satzes von Probenfärbeergebnissen werden Kontrollobjektträger benötigt: positive Gewebekontrolle, negative Gewebekontrolle und negative Reagenzkontrolle (Objektträger, behandelt mit Isotypkontrolle anstelle des primären Antikörpers).
Warnungen und Vorsichtsmaßnahmen
1. Tragen Sie geeignete persönliche Schutzausrüstung, um Kontakt mit Augen und Haut zu vermeiden.
2. Proben und alle ihnen ausgesetzten Materialien sollten vor oder nach der Fixierung wie infektiös behandelt und mit den entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen entsorgt werden.
3. Ersetzen Sie keine Reagenzien aus anderen Chargennummern oder aus Kits anderer Hersteller.
4. Inkubationszeiten oder -temperaturen, die von den Empfehlungen abweichen, müssen vom Benutzer validiert werden.
5. Nicht verwendete Lösung sollte gemäß den örtlichen Vorschriften entsorgt werden.
2. Proben und alle ihnen ausgesetzten Materialien sollten vor oder nach der Fixierung wie infektiös behandelt und mit den entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen entsorgt werden.
3. Ersetzen Sie keine Reagenzien aus anderen Chargennummern oder aus Kits anderer Hersteller.
4. Inkubationszeiten oder -temperaturen, die von den Empfehlungen abweichen, müssen vom Benutzer validiert werden.
5. Nicht verwendete Lösung sollte gemäß den örtlichen Vorschriften entsorgt werden.
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