L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) monoklonaler Kaninchen-Antikörper (ARA873)-ChIP-Qualität

Datenblatt

Sicherheitsdatenblatt

L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA873)-ChIP Grade

Hauptmerkmale und Details

Ziel: L-Lactyl-Histon H3 (Lys18)
Gastgeber: Kaninchen
Reaktivität: Mensch, Maus
Klonalität: Monoklonal
Anwendung: WB, ChIP, Cut&Tag
Lagerung: -20°C

Marke:

KAT.-NR. : ARA6699

US$ Bitte wählen

Größe:

50μL

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Produktdetails

Hintergrund

Histone sind grundlegende Kernproteine, die für die Nukleosomenstruktur der Chromosomenfaser in Eukaryoten verantwortlich sind. Diese Struktur besteht aus etwa 146 bp DNA, die um ein Nukleosom gewickelt ist, ein Oktamer, das aus Paaren jedes der vier Kernhistone (H2A, H2B, H3 und H4) besteht. Die Chromatinfaser wird durch die Wechselwirkung eines Linkerhistons, H1, mit der DNA zwischen den Nukleosomen weiter verdichtet, um Chromatinstrukturen höherer Ordnung zu bilden. Dieses Gen ist intronlos und kodiert ein replikationsabhängiges Histon, das ein Mitglied der Histon-H3-Familie ist. Den Transkripten dieses Gens fehlen PolyA-Schwänze; Stattdessen enthalten sie ein palindromisches Abschlusselement. Dieses Gen befindet sich im großen Histon-Gencluster auf Chromosom 6p22-p21.3.

Bewerbung

Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

Bewerbung	Verdünnungsverhältnis
WB	1:500 - 1:1000
ChIP	6 μg/5×10⁶ Zellen
Ausschneiden und markieren	1:100

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.

Übersicht

Isotyp	IgG
Reinigung	Protein A
Zelluläre Lokalisierung	Kern
Form/Puffer	PBS, Glycerin, BSA
UniProt-ID	P68431
Synonyme	H3K18la
Konjugat	Unkonjugiert
Spezifität	Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Kaninchen-mAb (ChIP-Qualität) erkennt Histon H3 nur, wenn es an Lys18 L-lactyliert ist.
UniProt-ID	P68431
Immunogen	L-lactyliertes menschliches Histon H3 (Lys18)-Peptid
MW (kDa)	15

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.

Daten

Peptidmenge: 4 ng, 16 ng, 64 ng
Blockierungspuffer: 5 % NFDM/TBST
Primäre Ab-Verdünnung: 1:2000
Primäre Ab-Inkubation: 2 Stunden bei Raumtemperatur
Sekundäre Ab: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG-H&L-pAb (HRP-Konjugat)
Belichtungszeit: 10 Sekunden
Die Liste der im Experiment verwendeten Peptide ist unten aufgeführt.
Spur 1: H3K18 L-lactyl. Spur 2: H3K18-Acetyl.
Spur 3: H3K18 Crotonyl. Spur 4: H3K18-Butyryl.
Spur 5: H3K18 Propionyl. Spur 6: H3K18 2-hydroxyisobutyryl.
Spur 7: H3K18 β-hydroxybutyryl. Spur 8: H3K18 unverändert

Lysate: (-) HeLa-Zellen; (+) HeLa-Zellen 24 Stunden lang mit 25 mM Natriumlactat behandelt
Proteinbeladungsmenge: 20 μg
Blockierungspuffer: 5 % NFDM/TBST
Primäre Ab-Verdünnung: 1:1000
Primäre Ab-Inkubation: 2 Stunden bei Raumtemperatur
Sekundäre Ab: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG-H&L-pAb (HRP-Konjugat)
Belichtungszeit: 60 Sekunden
Vorhergesagte Bandengröße: 15 kDa
Beobachtete Bandengröße: 15 kDa

Lysate: (-) K562-Zellen; (+) K562-Zellen 24 Stunden lang mit 25 mM Natriumlactat behandelt
Proteinbeladungsmenge: 20 μg
Blockierungspuffer: 5 % NFDM/TBST
Primäre Ab-Verdünnung: 1:1000
Primäre Ab-Inkubation: 2 Stunden bei Raumtemperatur
Sekundäre Ab: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG-H&L-pAb (HRP-Konjugat)
Belichtungszeit: 60 Sekunden
Vorhergesagte Bandengröße: 15 kDa
Beobachtete Bandengröße: 15 kDa

Lysate: (-) NIH/3T3-Zellen; (+) NIH/3T3-Zellen, 24 Stunden lang mit 25 mM Natriumlactat behandelt
Proteinbeladungsmenge: 20 μg
Blockierungspuffer: 5 % NFDM/TBST
Primäre Ab-Verdünnung: 1:1000
Primäre Ab-Inkubation: 2 Stunden bei Raumtemperatur
Sekundäre Ab: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG-H&L-pAb (HRP-Konjugat)
Belichtungszeit: 60 Sekunden
Vorhergesagte Bandengröße: 15 kDa
Beobachtete Bandengröße: 15 kDa

Probe: HeLa-Zellen, 24 Stunden lang mit 100 mM Natriumlactat behandelt
Vernetzungsbedingungen: keine Vernetzung
Chromatinmenge pro IP: 5×10⁶ Zellen
Ab-Menge pro IP: 6 μg
Kügelchentyp und -menge pro IP: 50 μl Protein A MagBeads
Beschreibung: Chromatin Immunpräzipitationen wurden mit 6 μg normalem Kaninchen-IgG als Negativkontrolle durchgeführt. Die immunpräzipitierte DNA wurde durch Echtzeit-PCR unter Verwendung von Primern quantifiziert, die für die humanen GAPDH-CDS-, LDHA-Promotor-, LDHA-, FOXO3a-Downstream-, RAB20- und TUBBP10-Regionen spezifisch sind. Die Daten werden als Anreicherung jeder Probe im Verhältnis zur Gesamteingabemenge an jedem Amplifikat dargestellt.

Probe: HeLa-Zellen, 24 Stunden lang mit 100 mM Natriumlactat behandelt
Zellmenge: 1×10⁵ Zellen
Primäre Ab-Verdünnung: 1:100
Primäre Ab-Inkubation: 4⁰C über Nacht
Sekundäre Ab: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG-H&L-pAb
Sekundäre Ab-Verdünnung: 1:1400
Beschreibung: CUT&Tag wurde mit Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Rabbit mAb zusammen mit normalem Kaninchen-IgG als Negativkontrolle durchgeführt. Die resultierende DNA wurde auf der Illumina NovaSeq-Plattform mit Paired-End-Reads von 150 bp und einer Sequenzierungstiefe von 3 Millionen Reads sequenziert. Die Abbildung zeigt signifikante H3K18la-Signalanreicherungen in den Promotorregionen von CD9, PLEKHG6, LTBR und GAPDH.

Lagerung

Versand bei 4℃. Ein Jahr lang bei -20℃ lagern. Vermeiden Sie wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen.

Hinweis

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische, therapeutische, prophylaktische oder in vivo-Anwendungen.

FAQs

Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?

Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.

Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?

Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.

Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?

Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.

Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?

Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.

Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?

Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.

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