Humanes CD28 ELISA-Kit
Hauptmerkmale und Details
- Spezifikation:
- Empfindlichkeit:
- Standardkurvenbereich:
- Standardkurvensteigung:
- Anzahl der Inkubationen:
- Probenvolumen:
- Testtyp:
- Betriebsdauer:
-
Marke:
KAT.-NR. : AEH0183
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Produktdetails
Hintergrund
CD28 und CTLA-4 bilden zusammen mit ihren Liganden B7-1 und B7-2 einen der dominanten kostimulatorischen Wege, die T- und B-Zell-Reaktionen regulieren. CD28 und CTLA-4 sind strukturell homologe Moleküle, die zur Superfamilie der Immunglobulin (Ig)-Gene gehören. Sowohl CD28 als auch CTLA-4 bestehen aus einem einzigen Ig
V-ähnliche extrazelluläre Domäne, eine Transmembrandomäne und eine intrazelluläre Domäne. CD28 und CTLA-4 werden beide auf der Zelloberfläche als disulfidgebundene Homodimere oder als Monomere exprimiert. Die für diese beiden Moleküle kodierenden Gene sind auf dem menschlichen Chromosom 2 und dem Maus-Chromosom 1 eng miteinander verbunden. Maus-CD28 wird konstitutiv auf praktisch 100 % der Maus-T-Zellen und auf sich entwickelnden Thymozyten exprimiert. Die Zelloberflächenexpression von Maus-CD28 wird durch die Ligation von CD28 in Gegenwart von PMA oder PHA herunterreguliert. Im Gegensatz dazu wird CTLA-4 nicht konstitutiv exprimiert, sondern nach T-Zell-Aktivierung und CD28-Ligation schnell hochreguliert. Die Zelloberflächenexpression von Maus-CTLA-4 erreicht ihren Höhepunkt etwa 48 Stunden nach der Aktivierung. Obwohl sowohl CTLA-4 als auch CD28 an dieselben Liganden binden können, bindet CTLA-4 an B7-1 und B7-2 mit einer 20-100-fach höheren Affinität als CD28. Es wurde gezeigt, dass die CD28/B7-Interaktion die Apoptose aktivierter T-Zellen durch die Hochregulierung von Bcl-xL verhindert. Es wurde auch gezeigt, dass die CD28-Ligation die Th1/Th2-Differenzierung reguliert.
V-ähnliche extrazelluläre Domäne, eine Transmembrandomäne und eine intrazelluläre Domäne. CD28 und CTLA-4 werden beide auf der Zelloberfläche als disulfidgebundene Homodimere oder als Monomere exprimiert. Die für diese beiden Moleküle kodierenden Gene sind auf dem menschlichen Chromosom 2 und dem Maus-Chromosom 1 eng miteinander verbunden. Maus-CD28 wird konstitutiv auf praktisch 100 % der Maus-T-Zellen und auf sich entwickelnden Thymozyten exprimiert. Die Zelloberflächenexpression von Maus-CD28 wird durch die Ligation von CD28 in Gegenwart von PMA oder PHA herunterreguliert. Im Gegensatz dazu wird CTLA-4 nicht konstitutiv exprimiert, sondern nach T-Zell-Aktivierung und CD28-Ligation schnell hochreguliert. Die Zelloberflächenexpression von Maus-CTLA-4 erreicht ihren Höhepunkt etwa 48 Stunden nach der Aktivierung. Obwohl sowohl CTLA-4 als auch CD28 an dieselben Liganden binden können, bindet CTLA-4 an B7-1 und B7-2 mit einer 20-100-fach höheren Affinität als CD28. Es wurde gezeigt, dass die CD28/B7-Interaktion die Apoptose aktivierter T-Zellen durch die Hochregulierung von Bcl-xL verhindert. Es wurde auch gezeigt, dass die CD28-Ligation die Th1/Th2-Differenzierung reguliert.
Typische Daten
|
pg/ml |
Außendurchmesser |
Durchschnittlich |
Korrigiert |
|
|
0.00 |
0.0102 |
0.0092 |
0.0097 |
|
|
156.25 |
0.0309 |
0.0313 |
0.0311 |
0.0214 |
|
312.50 |
0.0496 |
0.0578 |
0.0537 |
0.0440 |
|
625.00 |
0.0966 |
0.1092 |
0.1029 |
0.0932 |
|
1250.00 |
0.2040 |
0.2336 |
0.2188 |
0.2091 |
|
2500.00 |
0.5139 |
0.5597 |
0.5368 |
0.5271 |
|
5000.00 |
1.3250 |
1.5090 |
1.4170 |
1.4073 |
|
10000.00 |
3.3340 |
3.5900 |
3.4620 |
3.4523 |
Präzision
|
Intra-Assay-Präzision |
Präzision zwischen Assays |
|||||
|
Probennummer |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Durchschnitt (pg/ml) |
203.4 |
1052.0 |
3276.1 |
166.4 |
957.1 |
3088.7 |
|
Standardabweichung |
11.5 |
37.4 |
176.2 |
3.5 |
29.7 |
91.4 |
|
Variationskoeffizient (%) |
5.6 |
3.6 |
5.4 |
2.1 |
3.1 |
3.0 |
Spike Re
Die Spike-Erholung wurde durch Zugabe von 3 Konzentrationen von menschlichem CD28 in eine gesunde menschliche Serumprobe bewertet. Das nicht aufgestockte Serum wurde in diesem Experiment als Blindprobe verwendet.
Die Erholung reichte von 85 % bis 113 % mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 103 %.
Die Erholung reichte von 85 % bis 113 % mit einer durchschnittlichen Gesamtwiederherstellung von 103 %.
Beispielwerte
| Beispielmatrix | Probe ausgewertet | Bereich (pg/ml) | Nachweisbar (%) | Mittelwert der nachweisbaren Menge (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Serum | 30 | 3,32-816,93 | 100 | 104.41 |
Serum/Plasma – Dreißig Proben von scheinbar gesunden Freiwilligen wurden in diesem Test auf das Vorhandensein von CD28 untersucht. Von den Spendern lagen keine Krankengeschichten vor.
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