HIF1 alpha Kaninchen Polyklonaler Antikörper

Hauptmerkmale und Details

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen HIF1 alpha
  • Ziel: HIF1 alpha
  • Quelle/Host: Kaninchen
  • Reaktivität: Mensch, Maus, Ratte, Rind, Hund
  • Klonalität: Polyklonal
  • Anwendungen: WB, IHC, IF/ICC
  • Konjugation: Unkonjugiert
  • Lagerung: bei -20°C
  • Marke:
KAT.-NR. : APA08630
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Größe:
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Produktdetails
Hintergrund
Fungiert als Haupttranskriptionsregulator der adaptiven Reaktion auf Hypoxie. Aktiviert unter hypoxischen Bedingungen die Transkription von über 40 Genen, darunter Erythropoietin, Glukosetransporter, glykolytische Enzyme, vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor, HILPDA und andere Gene, deren Proteinprodukte die Sauerstoffzufuhr erhöhen oder die metabolische Anpassung an Hypoxie erleichtern. Spielt eine wesentliche Rolle bei der embryonalen Vaskularisierung, der Tumorangiogenese und der Pathophysiologie ischämischer Erkrankungen. Heterodimerisiert mit ARNT; Heterodimer bindet an die Kern-DNA-Sequenz 5'-TACGTG-3' innerhalb des Hypoxie-Response-Elements (HRE) der Zielgen-Promotoren. Die Aktivierung erfordert die Rekrutierung von Transkriptionskoaktivatoren wie CREBBP und EP300. Die Aktivität wird durch die Interaktion mit NCOA1 und/oder NCOA2 verstärkt.
Bewerbung
Um eine optimale Testleistung sicherzustellen, empfiehlt AREX die Durchführung einer auf jedes Testsystem zugeschnittenen Reagenzientitration, um optimale Nachweisergebnisse zu erzielen.

WB

1:500 - 1:1000

IHC

1:50 - 1:100

IF/ICC

1:50 - 1:200

*Ergebnisse sind probenspezifisch. Bitte beziehen Sie sich als Referenz auf Ihre lokalen Testbedingungen und Testparameter.
Übersicht

Beschreibung

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen HIF1 alpha

Spezifität

Erkennt endogene Mengen an HIF1-Alpha-Protein.

Antikörpertyp

Primärer Antikörper

Immunogen

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das eine Sequenz innerhalb der zentralen Region von menschlichem HIF1 alpha umfasst. Die genaue Reihenfolge ist urheberrechtlich geschützt.

Reinigung

Der Antikörper wurde durch Immunogenaffinitätschromatographie gereinigt.

Molekulargewicht

Voraussichtlich: 92 kD; Beobachtet: 120; 93 kD

Form/Puffer

Flüssigkeit aus 0,42 % Kaliumphosphat, 0,87 % Natriumchlorid, pH 7,3, 30 % Glycerin und 0,01 % Natriumazid.

Alternative Namen

BHLHE78; MOP1; PASD8; Hypoxie-induzierbarer Faktor 1-alpha; HIF-1-alpha; HIF1-alpha; ARNT-interagierendes Protein; Basic-helix-loop-helix-PAS-Protein MOP1; Grundlegendes Helix-Loop-Helix-Protein der Klasse E 78; bHLHe78; Mitglied des PAS-Proteins 1; PAS-Domäne-enthält Protein 8

Gensymbol

HIF1A

Entrez Gene

3091 (Mensch); 15251(Maus); 29560(Ratte)

SwissProt

Q16665 (Mensch); Q61221(Maus); O35800(Ratte)

*AREX optimiert unsere Produkte kontinuierlich. Der Inhalt der Webseite spiegelt möglicherweise nicht die neuesten Aktualisierungen wider. Für Anfragen wenden Sie sich bitte an info@arexbio.com oder Ihren lokalen Händler.
*Klonnummer, Reaktivität, Quelle/Host und Klonalität finden Sie oben im Abschnitt Produktname und Hauptfunktionen.
Daten

Western-Blot-Analyse der HIF1-Alpha-Expression in Ganzzelllysaten von HEK293T (A), A549 (B), MCF7 (C), H9C2 (D) und SP20 (E). (Vorhergesagte Bandengröße: 92 kD; beobachtete Bandengröße: 120; 93 kD)

Immunhistochemische Analyse der HIF1-Alpha-Färbung in einem mit Formalin fixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitt des menschlichen Gehirns. Der Schnitt wurde mittels wärmevermittelter Antigengewinnung mit Natriumcitratpuffer (pH 6,0) vorbehandelt. Anschließend wurde der Schnitt mit dem Antikörper bei Raumtemperatur inkubiert und mithilfe eines HRP-konjugierten Kompaktpolymersystems nachgewiesen. Als Chromogen wurde DAB verwendet. Anschließend wurde der Schnitt mit Hämatoxylin gegengefärbt und mit DPX fixiert.

Immunfluoreszenzanalyse der HIF1-Alpha-Färbung in LO2-Zellen. Formalinfixierte Zellen wurden mit 0,1 % Triton X-100 in TBS 5-10 Minuten lang permeabilisiert und mit 3 % BSA-PBS 30 Minuten lang bei Raumtemperatur blockiert. Die Zellen wurden mit dem primären Antikörper in 3 % BSA-PBS sondiert und über Nacht bei 4 °C in einer versteckten Kammer inkubiert. Die Zellen wurden mit PBST gewaschen und mit einem AREX® Fluor 488 -konjugierten Sekundärantikörper (grün) in PBS bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubiert. Phalloidin - AREX® Fluor 594 wurde zum Färben von Aktinfilamenten (rot) verwendet. Zur Färbung der Zellkerne (blau) wurde DAPI verwendet.

Lagerung
Kurzfristig bei 4°C lagern. Bei längerer Lagerung bei -20 °C lagern und Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.
Hinweis
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische, therapeutische, prophylaktische oder in vivo-Anwendungen.
FAQs
Was sind die wichtigsten Arten von Forschungsantikörpern und wie unterscheiden sie sich?
Forschungsantikörper werden hauptsächlich in monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper unterteilt. Monoklonale Antikörper bieten in der Regel eine höhere Spezifität und eine bessere Chargenkonsistenz, während polyklonale Antikörper oft eine stärkere Affinität bieten, aber möglicherweise größere Unterschiede zwischen den Chargen aufweisen. Die Wahl hängt von Ihren spezifischen experimentellen Anforderungen ab.
Wie kann ich feststellen, ob ein Forschungsantikörper für mein Experiment geeignet ist?
Es wird empfohlen, das Produktdatenblatt sorgfältig auf validierte Anwendungen, Speziesreaktivität, empfohlene Verdünnungen und veröffentlichte Referenzen zu prüfen. Bei neuen Antikörpern ist in der Regel die Durchführung einer Validierung im kleinen Maßstab mit positiven Kontrollproben hilfreich.
Kann eine unsachgemäße Lagerung von Forschungsantikörpern die Versuchsergebnisse beeinflussen?
Ja. Antikörper reagieren empfindlich auf Temperatur, wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen und Kontamination. Eine unsachgemäße Lagerung kann zu verminderter Aktivität, erhöhtem Hintergrund oder schwächeren Signalen führen. Befolgen Sie am besten die Lagerungshinweise im Produktdatenblatt.
Warum funktioniert die im Datenblatt empfohlene Verdünnung in meinem Experiment nicht?
Die empfohlene Verdünnung richtet sich nach den Testbedingungen des Lieferanten. Faktoren wie Probentyp, Fixierungsmethode und Nachweissystem in Ihrem Labor können die optimale Arbeitskonzentration beeinflussen. Oft ist es notwendig, eine Verdünnungsreihenoptimierung im eigenen System durchzuführen.
Welche Vorsichtsmaßnahmen sollte ich treffen, wenn ich einen neu erworbenen Forschungsantikörper zum ersten Mal verwende?
Es empfiehlt sich, den Antikörper (insbesondere konzentrierte oder lyophilisierte) kurz zu zentrifugieren und anschließend einen kleinen Pilotversuch unter den empfohlenen Bedingungen durchzuführen. Auch die Aufzeichnung der Chargennummer und des Verwendungsdatums ist für die zukünftige Nachverfolgung hilfreich.
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