نظرة عامة على لطخة غربية

اللطخة الغربية، والتي تسمى أحيانًا البقعة المناعية للبروتين، هي تقنية تحليلية تستخدم على نطاق واسع في البيولوجيا الجزيئية وعلم الوراثة المناعية للكشف عن بروتينات معينة في عينة من الأنسجة المتجانسة أو المستخلصة. إلى جانب الكشف عن البروتينات، يتم استخدام هذه التقنية أيضًا لتصور البروتينات المختلفة وتمييزها وتحديد كميتها في خليط البروتين المعقد.

الخطوات الأساسية في تقنية اللطخة الغربية

تتضمن تقنية اللطخة الغربية ثلاث خطوات رئيسية: الفصل حسب الحجم، ونقل البروتينات إلى مادة داعمة صلبة، ووضع علامة على البروتين المستهدف باستخدام الأجسام المضادة الأولية والثانوية للتصور. يتم إنشاء جسم مضاد صناعي أو مشتق من الحيوان (الجسم المضاد الأساسي) للتعرف على بروتين مستهدف محدد والارتباط به. يتم غسل غشاء الرحلان الكهربي في محلول يحتوي على الجسم المضاد الأولي، وبعد ذلك يتم غسل الجسم المضاد الزائد. ثم تتم إضافة الجسم المضاد الثانوي، الذي يتعرف على الجسم المضاد الأولي ويرتبط به. يتم تصور الجسم المضاد الثانوي من خلال طرق مختلفة، مثل التلوين والتألق المناعي والنشاط الإشعاعي، مما يسمح بالكشف غير المباشر عن البروتين المستهدف المحدد.

التقنيات ذات الصلة

تشمل التقنيات الأخرى ذات الصلة تحليل اللطخة النقطية، واللطخة النقطية الكمية، والكيمياء المناعية، والكيمياء المناعية، حيث يتم استخدام الأجسام المضادة للكشف عن البروتينات في الأنسجة والخلايا عن طريق الصبغ المناعي، بالإضافة إلى مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA).