Tau (S305) Fare Monoklonal Antikoru (ARA971)

Tau'nun (S305) ARA6837 ile Western blot analizi.
Çeşitli protein örnekleri indirgeyici koşullar altında %6-18 SDS-PAGE üzerinde çalıştırıldı ve nitroselüloz membran üzerine lekelendi. Birincil antikor olarak ARA6837 kullanıldı ve ikincil antikor olarak peroksidaz konjuge keçi anti-fare IgG'si kullanıldı. Tau bandı ECL Western Blotting Substrate kullanılarak görselleştirildi.
Şerit 1: 15 μg beyin dokusu lizatı
Şerit 2: 15 μg sıçan beyin dokusu lizatı
Şerit 3: 15 μg fare beyni dokusu2 lizatı
Sonuç: ARA6837, Tau'yu Western blot yöntemiyle tespit edebilir.

IHC-P, formalin-sabit, parafine-gömülü beyin dokusunun kesitleri kullanılarak gerçekleştirildi. Antijen, 3 dakika süreyle düdüklü tencerede kaynayan Tris/EDTA tamponu pH 9'un eklenmesiyle geri kazanıldı. Endojen peroksidaz aktivitesi, kesitlerin oda sıcaklığında 30 dakika boyunca %3 H₂O₂ ile inkübe edilmesiyle söndürüldü. Kesitler daha sonra oda sıcaklığında 1 saat boyunca birincil antikor (ARA6837) ile inkübe edildi. İkincil antikor olarak poli-peroksidaz konjuge keçi anti-fare IgG'si kullanıldı. Kromojen olarak diaminobenzidin kullanıldı. Kesit hematoksilen ile zıt boyandı. Fosfat - tamponlu salinle inkübe edilen ve ardından ikincil antikorla inkübe edilen bir doku kesiti, arka plan kontrolü olarak kullanıldı.
Sonuç: Neuropil pozitif boyandı.


Tau'nun (S305) ARA6837 ve ARA6844 ile sandviç ELISA analizi.
Mikrotitre plakaları, yakalama antikoru olarak ARA6844 ile kaplandı. Antijen olarak rekombinant pTau181 proteini (Kat. AXP6613) uygulandı. Peroksidazla konjuge edilmiş pTau181 Antikoru (ARA6837), tespit antikoru olarak görev yaptı.
Sonuç: ARA6837 ve ARA6844, pTau181 konsantrasyonunu tespit etmek ve ölçmek için uyumlu bir antikor çifti olarak kullanılabilir.

ARA6837 ve ARA6848 ile Tau'nun (S305) sandviç ELISA analizi.
Mikrotitre plakaları, yakalama antikoru olarak ARA6848 ile kaplandı. Antijen olarak rekombinant pTau205 proteini (Kat. AXP6615) uygulandı. Biyotin-konjuge pTau205 Antikoru (ARA6837) tespit antikoru olarak görev yaptı, ardından streptavidin-HRP inkübasyonu yapıldı.
Sonuç: ARA6837 ve ARA6848, pTau205 konsantrasyonunu tespit etmek ve ölçmek için uyumlu bir antikor çifti olarak kullanılabilir.

ARA6837'nin ELISA ile diğer peptitlere ve rekombinant proteinlere çapraz reaktivitesi. Mikrotitre kuyucukları çeşitli peptidler ve rekombinant proteinlerle kaplandı.
Birincil antikor olarak ARA6837 kullanıldı ve ikincil antikor olarak peroksidaz konjuge keçi anti-fare IgG'si kullanıldı.
Sonuç: ARA6837, fosforilasyondan bağımsız olarak Tau proteinlerini tespit edebilir.

Tau'nun (S305) ARA6837 ile immünofloresan analizi. Primer sıçan nöronlarının Tau (S305) antikoru (ARA6837) ile immünofloresan analizi. Hücreler sabitlendi, geçirgenleştirildi, bloke edildi ve birincil antikorla (1:250) inkübe edildi. İkincil antikor boyamanın ardından çekirdekler zıt boyandı.


ELISA ile ARA6837 ile Tau'nun (S305) epitop analizi.
Belirtilen kalıntıları içeren sentetik peptitler, mikrotitre kuyucuklarına kaplandı. P10636-8 izoformuna sahip rekombinant Tau (2-244), Tau (1-368), Tau (243-368) ve Tau (1-441) proteinleri veya P10636-1 izoformuna sahip Tau (1-758) proteinleri de kaplandı. ARA6837 antikoru birincil antikor olarak uygulandı. İkincil antikor olarak Peroksidaz-konjuge keçi anti-fare IgG'si kullanıldı ve kolorimetrik bir analiz kullanılarak sinyaller tespit edildi.
Sonuç: ARA6837, HVPGGG dizisini paylaşan S305 ve S356 peptidlerini içeren Tau proteinini tanır.