İnsan IL-8/CXCL8 ELISA Kiti

IL-8, GCP-1 ve NAP-1 olarak da bilinen İnterlökin-8 (IL-8), kemokinlerin alfa veya CXC ailesinin heparin-bağlayıcı 8-9 kDa üyesidir. Hepsi üç beta -tabaka/bir alfa -sarmal yapısını benimseyen en az 15 insan CXC ailesi üyesi vardır. Çoğu CXC kemokin, bir N-terminal Glu-Leu-Arg (ELR) tripeptit motifi gösterir. IL-8, CXCL4/PF4 ile bir monomer, homodimer ve heterodimer olarak dolaşır. Monomer en biyolojik olarak aktif olarak kabul edilirken, heterodimer PF4 aktivitesini güçlendirebilir. IL-8 oligomerizasyonu, matris ve hücre yüzeyi glikozaminoglikanları (GAG'ler) ile etkileşimleri tarafından modüle edilir. Olgun insan IL-8, köpek, kedi ve domuz IL-8 ile %65-69 amino asit (aa) kimliğini paylaşır. Kemirgenlerde IL-8 gen karşılığı yoktur. - IL-8'in çoklu izoformları, hem alternatif birleştirme hem de diferansiyel proteolitik bölünme yoluyla üretilir. İnsanlarda alternatif birleştirme, C-terminalinde on bir aa ikamesi olan bir izo-form oluşturur. Proteolitik işlem, IL-8'in N-terminalinin kesilmesiyle sonuçlanır ve muhtemelen hücreye özgü bir olaydır. Örneğin, fibroblastlar ve endotel hücreleri Glu21'i takiben IL-8'i bölerek 1-77 formunu oluştururken monositler ve lenfositler Leu25'i takip ederek 6-77 formunu oluşturur. Bu kesik formlar genellikle, özellikle CXCR1 reseptörü yoluyla artan biyoaktivite gösterir. IL-8 aynı zamanda öncünün Arg27'sinde sitrülinasyona da uğrayabilir; bu, onun yarı ömrünü ve lökositozu tetikleme yeteneğini artıran bir modifikasyondur. Monositler ve nötrofiller, fibroblastlar ve keratinositler, mast hücreleri, visseral düz kas hücreleri, dendritik hücreler, tip II büyük alveolar hücreler ve endotel hücreleri dahil olmak üzere çok çeşitli hücreler IL-8 salgılar. - IL-8 biyoaktivitesine, CXCR1/IL-8 RA ve CXCR2/IL-8 RB olarak adlandırılan iki G-protein-bağlı reseptör aracılığıyla aracılık edilir. CXCR1'in boyutu 45-50 kDa'dır ve neredeyse yalnızca IL-8 tarafından kullanılır. CXCR2'nin boyutu 35-40 kDa'dır ve neredeyse tüm CXC kemokinleri tarafından kullanılır. Hem CXCR1 hem de CXCR2 yapısal olarak fonksiyonel homodimerlerle birleşir. Ayrıca heterodimerleşebilirler ancak bu kompleksler IL-8 bağlanmasını takiben ayrışırlar. CXCR2, düşük IL-8 konsantrasyonlarına yanıt verir ve temel olarak kemotaksis ve MMP-9 salınımıyla ilişkilidir. CXCR1, aksine, yüksek konsantrasyonlarda IL-8'e yanıt verir ve solunum patlaması ve fosfolipaz D2 aktivasyonu ile ilişkilidir. Böylece, CXCR2 ligasyonu, lökositlerin aktive edilmiş vasküler endotelyuma yapışmasını ve inflamasyon bölgelerine göçünü indüklerken, CXCR1 ligasyonu, nötrofil antimikrobiyal aktivitesini başlatır. IL-8 ayrıca Serpin A1/alfa-1 Antitripsin ile de kompleks oluşturabilir ve bu, IL-8'in CXCR1 ile etkileşimini engeller. - Pro-inflamatuar etkilerine ek olarak IL-8, anjiyogenezde ve ateroskleroz ve kanserin patogenezinde rol oynar. Vasküler endotelyal hücrelerde VEGF ekspresyonunu indükler ve EC büyümesi ve anjiyogenez için bir otokrin faktör olarak işlev görür. Aterosklerotik lezyonlarda yukarı doğru düzenlenir ve miyokard enfarktüsünü takiben serumda ve beyin omurilik sıvısında yükselir. Kanserde IL-8, epitelyal-mezenkimal geçişin yanı sıra tümör hücresi istilasını ve metastazını da destekler.

pg/ml	Aşırı doz		Ortalama	Düzeltildi
0.00	0.0381	0.0373	0.0377
4.12	0.0493	0.0533	0.0513	0.0136
12.35	0.0743	0.0785	0.0764	0.0387
37.04	0.1583	0.1604	0.1594	0.1217
111.11	0.3773	0.3767	0.377	0.3393
333.33	0.9294	0.9447	0.9371	0.8994
1000.00	2.3256	2.3424	2.3340	2.2963
3000.00	4.0171	4.1382	4.0777	4.0400

	Test İçi Hassasiyet			Testler Arası Hassasiyet
Örnek Numarası	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Ortalama(pg/ml)	54.3	279.3	896.1	51.2	259.7	780.4
Standart Sapma	1.9	8.3	31.3	3.4	14.2	25.7
Değişim Katsayısı (%)	3.4	3	3.5	6.7	5.5	3.3

Tahlil İçi Hassasiyet (Bir tahlil içindeki hassasiyet) Tahlil içi kesinliği değerlendirmek için bilinen konsantrasyondaki üç numune bir plaka üzerinde yirmi kez test edildi.

Tahliller Arası Hassasiyet (Tahliller arası hassasiyet) Tahlil içi hassasiyeti değerlendirmek için bilinen konsantrasyona sahip üç numune, bir plaka üzerinde altı kez test edildi.

Ani artış geri kazanımı, sağlıklı insan serum numunesine 3 düzeyde insan IL-8 eklenerek değerlendirildi. Katkısız serum bu deneyde boş olarak kullanıldı.
İyileşme %84 ila %117 arasında değişiyordu ve genel ortalama iyileşme %102'ydi.

Örnek Matris	Örnek Değerlendirildi	Aralık (pg/ml)	Tespit edilebilir (%)	Tespit Edilebilir Ortalama (pg/ml)
Serum	30	43.4-359.3	100	127.2

Serum/Plazma – Görünüşte sağlıklı gönüllülerden alınan otuz örnek bu testte IL-8 varlığı açısından değerlendirildi. Bağışçıların tıbbi geçmişi mevcut değildi.