ATG4A Fare Monoklonal Antikoru (C3959)

MSDS'ler

Temel özellikler ve ayrıntılar

ATG4A'ya fare monoklonal antikoru

Hedef: ATG4A
Kaynak/Ana Bilgisayar: Fare
Reaktivite: İnsan
Klonalite: Monoklonal
Uygulamalar: WB, IHC, IF/ICC, FC
Konjugasyon: konjuge olmayan
Depolama: 20°C'de

Marka:

KAT.NO. : AMA03571

ABD Doları Lütfen seçin

Boyut:

50μL 100μL

İz, Toplu boyut veya Özel istekler Lütfen bizimle iletişime geçin

Ürün Detayları

Arkaplan

ATG8 ailesi proteinlerinin hem proteolitik aktivasyonuna hem de delipidasyonuna aracılık ederek otofajide anahtar rol oynayan sistein proteaz. ATG8 familyası proteinlerinin proteolitik aktivasyonu için proteaz aktivitesi gereklidir: ATG8 proteinlerinin C-terminal amino asidini bölerek bir C-terminal glisini ortaya çıkarır. Glisinin C-terminalinde açığa çıkması, ATG8 proteinlerinin fosfatidiletanolamine (PE) konjugasyonu ve otofaji için gerekli olan membranlara yerleştirilmesi için gereklidir. Tercih edilen substrat GABARAPL2, ardından MAP1LC3A ve GABARAP'tır. Proteaz aktivitesi aynı zamanda ATG8 proteinlerinin yüksek moleküler ağırlıklı konjugatlarının (ATG8ilasyon) oluşumunu engellemek için de gereklidir: ATG3 gibi diğer proteinlere konjuge olan ATG8'i uzaklaştıran deubikuitinasyon benzeri bir enzim olarak görev yapar.

Başvuru

AREX, optimum test performansını sağlamak amacıyla, optimum tespit sonuçları için her test sistemine uygun reaktif titrasyonunun yapılmasını önerir.

WB	1:500 - 1:1000
IHC	1:50 - 1:200
IF/ICC	1:10 - 1:50
FC	1:10 - 1:50

*Sonuçlar numuneye özeldir. Referans için lütfen yerel test koşullarınıza ve test parametrelerine bakın.

Genel Bakış

Açıklama	ATG4A'ya fare monoklonal antikoru
özgüllük	ATG4A proteininin endojen seviyelerini tanır.
Antikor Tipi	Birincil antikor
İmmünojen	İnsan ATG4A'nın rekombinant füzyon proteini. Kesin sıralama tescillidir.
Arıtma	Bu antikor, bir protein G kolonu yoluyla saflaştırılır.
Molekül Ağırlığı	Tahmin edilen: 45 kD; Gözlemlenen: 45 kD
Form/Arabellek	Fare IgG2b kappa. PBS içinde sıvı, pH 7,3, %30 gliserol ve %0,01 sodyum azid.
Alternatif İsimler	APG4A; AUTL2; Sistein proteaz ATG4A; AUT-2 sistein endopeptidaz gibi; Otofagin-2; Otofaji-ilişkili sistein endopeptidaz 2; Otofaji-ilişkili protein 4 homolog A; hAPG4A
Gen Sembolü	ATG4A
Entrez Geni	115201(İnsan)
İsviçreProt	Q8WYN0(İnsan)

*AREX ürünlerimizi sürekli olarak optimize eder. Web sayfası içeriği en son güncellemeleri yansıtmayabilir. Sorularınız için lütfen info@arexbio.com veya yerel distribütörünüzle iletişime geçin.
*Klon Numarası, Reaktivite, Kaynak/Ana Bilgisayar ve Klonluk yukarıdaki ürün adı ve Temel Özellikler bölümünde bulunabilir.

Veri

K562 (A) tam hücre lizatlarında ATG4A ekspresyonunun Western blot analizi. (Tahmini bant boyutu: 45 kD; Gözlemlenen bant boyutu: 45 kD)

İnsan beyni formalinle sabitlenmiş parafine gömülü doku bölümünde ATG4A boyamasının immünohistokimyasal analizi. Kesit, sodyum sitrat tamponu (pH 6.0) ile ısı aracılı antijen geri kazanımı kullanılarak ön işleme tabi tutuldu. Kesit daha sonra oda sıcaklığında antikorla inkübe edildi ve bir HRP konjuge kompakt polimer sistemi kullanılarak tespit edildi. Kromojen olarak DAB kullanıldı. Kesit daha sonra hematoksilen ile zıt boyandı ve DPX ile monte edildi.

Hela hücrelerinde ATG4A boyamasının immünofloresan analizi. Formalin-sabit hücreler, TBS içerisinde %0.1 Triton X-100 ile 5-10 dakika süreyle geçirgenleştirildi ve oda sıcaklığında 30 dakika süreyle %3 BSA-PBS ile bloke edildi. Hücreler %3 BSA-PBS içindeki birincil antikorla incelendi ve nemlendirilmiş bir odada gece boyunca 4 °C'de inkübe edildi. Hücreler PBST ile yıkandı ve karanlıkta oda sıcaklığında PBS içerisinde AREX® Fluor 488 - konjuge ikincil antikor (yeşil) ile inkübe edildi. Phalloidin - AREX® Fluor 555, Aktin filamentlerini (kırmızı) boyamak için kullanıldı. DAPI hücre çekirdeklerini (mavi) boyamak için kullanıldı.

Anti-ATG4A Antikoru kullanılarak Hela hücrelerinin akış sitometrik analizi. Hücreler %2 paraformaldehid (10 dakika) ile sabitlendi ve daha sonra 10 dakika boyunca %90 metanol ile geçirgenleştirildi. Hücreler, spesifik olmayan protein-protein etkileşimlerini bloke etmek için %2 sığır serum albümini içerisinde inkübe edildi ve ardından antikor, 37 °C'de 60 dakika süreyle inkübe edildi. İkincil antikor Keçi Anti-Fare IgG (H&L) - AREX® Fluor 488, 37 °C'de 40 dakika boyunca inkübe edildi. İzotip kontrol antikoru (mavi çizgi) aynı koşullar altında kullanıldı.

Depolama

Kısa süreli 4°C'de saklayın. Uzun süreli saklama için, donma/çözülme döngülerinden kaçınarak -20°C'de saklayın.

Not

Yalnızca Araştırma Kullanımı İçindir. Teşhis prosedürlerinde kullanılmaz.

SSS

Araştırma antikorlarının ana türleri nelerdir ve bunlar nasıl farklılık gösterir?

Araştırma antikorları temel olarak monoklonal antikorlar ve poliklonal antikorlar olarak ikiye ayrılır. Monoklonal antikorlar tipik olarak daha yüksek özgüllük ve daha iyi partiler arası tutarlılık sunarken, poliklonal antikorlar sıklıkla daha güçlü afinite sağlar ancak gruplar arasında daha fazla çeşitlilik gösterebilir. Seçim özel deneysel ihtiyaçlarınıza bağlıdır.

Bir araştırma antikorunun denemem için uygun olup olmadığını nasıl anlarım?

Doğrulanmış uygulamalar, türlerin reaktivitesi, önerilen seyreltmeler ve yayınlanmış referanslar için ürün veri sayfasını dikkatle incelemeniz önerilir. Yeni antikorlar için pozitif kontrol örnekleriyle küçük ölçekli doğrulama yapılması genellikle yararlı olur.

Araştırma antikorlarının uygunsuz şekilde saklanması deney sonuçlarını etkileyebilir mi?

Evet. Antikorlar sıcaklığa, tekrarlanan donma/çözülme döngülerine ve kirlenmeye karşı duyarlıdır. Uygun olmayan depolama, etkinliğin azalmasına, arka planın artmasına veya sinyallerin zayıflamasına neden olabilir. Ürün veri sayfasında sağlanan saklama talimatlarını takip etmek en iyisidir.

Veri sayfasında önerilen seyreltme denememde neden iyi çalışmıyor?

Önerilen seyreltme tedarikçinin test koşullarına dayanmaktadır. Laboratuvarınızdaki numune türü, sabitleme yöntemi ve tespit sistemi gibi faktörler optimum çalışma konsantrasyonunu etkileyebilir. Kendi sisteminizde seyreltme serisi optimizasyonunun gerçekleştirilmesi çoğu zaman gereklidir.

Yeni satın alınan bir araştırma antikorunu ilk kez kullanırken ne gibi önlemler almalıyım?

Antikorun (özellikle konsantre veya liyofilize olanların) kısa bir süre santrifüj edilmesi, ardından önerilen koşullar kullanılarak küçük ölçekli bir pilot deney yapılması tavsiye edilir. Parti numarasının ve kullanım tarihinin kaydedilmesi de gelecekteki takip açısından faydalıdır.

Yeni Ürünler

CRBN Tavşan Monoklonal Antikoru (ARA644)

HEK293 HCP ELISA Kiti

E.coli HCP ELISA Kiti

Protein Carbamylation Quantitative ELISA Kit

Protein Karbamilasyon Kantitatif ELISA Kiti

ARExVisual® Enhanced Poly-HRP Goat Anti-Mouse,Rabbit IgG

ARExVisual® Geliştirilmiş Poly-HRP Keçi Anti-Fare,Tavşan IgG

Parafibromin/CDC73 Rabbit Monoclonal Antibody(ARA645)

Parafibromin/CDC73 Tavşan Monoklonal Antikoru (ARA645)