L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Monoklonal antikropp från kanin(ARA873)-ChIP-kvalitet

Datablad

MSDS

L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Rabbit Monoclonal Antibody(ARA873)-ChIP Grade

Nyckelfunktioner och detaljer

Mål: L-Lactyl-Histone H3 (Lys18)
Värd: Kanin
Reaktivitet: Människan, mus
Klonalitet: Monoklonal
Applikation: WB, Chip, Cut&tag
Lagring: -20°C

Märke:

KAT.NR. : ARA6699

US$ Välj

Storlek:

50 μL

Trail, bulkstorlek eller anpassade önskemål Vänligen kontakta oss

Produktdetaljer

Bakgrund

Histoner är grundläggande kärnproteiner som är ansvariga för nukleosomstrukturen hos kromosomfibrerna i eukaryoter. Denna struktur består av cirka 146 bp DNA lindat runt en nukleosom, en oktamer som består av par av var och en av de fyra kärnhistonerna (H2A, H2B, H3 och H4). Kromatinfibern komprimeras ytterligare genom interaktionen av en länkhiston, H1, med DNA:t mellan nukleosomerna för att bilda kromatinstrukturer av högre ordning. Denna gen är intronlös och kodar för en replikationsberoende histon som är en medlem av histon-H3-familjen. Transkript från denna gen saknar polyA-svansar; istället innehåller de ett palindromiskt termineringselement. Denna gen finns i det stora histongenklustret på kromosom 6p22-p21.3.

Ansökan

För att säkerställa optimal analysprestanda rekommenderar AREX att man utför reagenstitrering skräddarsydd för varje testsystem för optimala detekteringsresultat.

Ansökan	Spädningsförhållande
WB	1:500 - 1:1000
Chip	6 μg/5×10⁶ celler
Klipp&tagga	1:100

*Resultaten är provspecifika. Se dina lokala analysförhållanden och testparametrar för referens.

Översikt

Isotyp	IgG
Rening	Protein A
Cellulär lokalisering	Kärna
Form/buffert	PBS, Glycerol, BSA
UniProt ID	P68431
Synonymer	H3K18la
Konjugera	Okonjugerad
Specificitet	Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) Kanin mAb (ChIP Grade) detekterar histon H3 endast när den L-laktyleras vid Lys18.
UniProt ID	P68431
Immunogen	L-laktylerad human histon H3 (Lys18) peptid
MW (kDa)	15

*AREX optimerar kontinuerligt våra produkter. Webbsidans innehåll kanske inte återspeglar de senaste uppdateringarna. För frågor, vänligen kontakta info@arexbio.com eller din lokala distributör.
*Klonnummer, reaktivitet, källa/värd och klonalitet finns i avsnittet produktnamn och nyckelfunktioner ovan.

Data

Peptidmängd: 4 ng, 16 ng, 64 ng
Blockeringsbuffert: 5 % NFDM/TBST
Primär Ab-spädning: 1:2000
Primär Ab-inkubation: 2 timmar vid rumstemperatur
Sekundär Ab: Get Anti-Kanin IgG-tid (HRP-konjugat) (HRP) 10 sekunder
Listan över peptider som användes i experimentet finns nedan.
Ban 1: H3K18 L-laktyl. Bana 2: H3K18 acetyl.
Lane 3: H3K18 krotonyl. Bana 4: H3K18 butyryl.
bana 5: H3K18 propionyl. Spår 6: H3K18 2-hydroxiisobutyryl.
Spår 7: H3K18 β-hydroxibutyryl. Bana 8: H3K18 oförändrad

Lysater: (-) HeLa-celler; (+) HeLa-celler behandlade med 25 mM natriumlaktat under 24 timmar
Proteinladdningsmängd: 20 μg
Blockeringsbuffert: 5 % NFDM/TBST
Primär Ab-spädning: 1:1000
Primär Ab-inkubation: 2 timmar vid rumstemperatur Abb: IGbit i rumstemperatur
IGbit. pAb (HRP-konjugat)
Exponeringstid: 60 sekunder
Förutspådd bandstorlek: 15 kDa
Observerad bandstorlek: 15 kDa

Lysater: (-) K562-celler; (+) K562-celler behandlade med 25 mM natriumlaktat under 24 timmar
Proteinladdningsmängd: 20 μg
Blockeringsbuffert: 5 % NFDM/TBST
Primär Ab-spädning: 1:1000
Primär Ab-inkubation: 2 timmar Go-konunderad- IGbit: 2 timmar vid rumstemperatur - H&L pAb (HRP-konjugat)
Exponeringstid: 60 sekunder
Förutspådd bandstorlek: 15 kDa
Observerad bandstorlek: 15 kDa

Lysater: (-) NIH/3T3-celler; (+) NIH/3T3-celler behandlade med 25 mM natriumlaktat under 24 timmar
Proteinladdningsmängd: 20 μg
Blockeringsbuffert: 5 % NFDM/TBST
Primär Ab-spädning: 1:1000
Primär Ab-inkubation:
Ab-inkubation i rumstemperatur: < 2 timmar - IgG H&L pAb (HRP-konjugat)
Exponeringstid: 60 sekunder
Förutspådd bandstorlek: 15 kDa
Observerad bandstorlek: 15 kDa

Prov: HeLa-celler behandlade med 100 mM natriumlaktat i 24 timmar
Tvärbindningsförhållanden: ingen tvärbindning
Mängd kromatin per IP: 5×10⁶ celler
Mängd Ab per IP: 6 μg IPs
Pärla: μg
A protein MagBeads
Beskrivning: Kromatinimmunfällningar utfördes med 6 μg normalt kanin-IgG som negativ kontroll. Det immunutfällda DNA:t kvantifierades genom realtids-PCR med användning av primrar specifika för de humana GAPDH-CDS, LDHA-promotorn, LDHA, FOXO3a nedströms, RAB20 och TUBBP10-regionerna. Data presenteras som anrikning av varje prov i förhållande till den totala mängden input vid varje amplikon.

Prov: HeLa-celler behandlade med 100 mM natriumlaktat i 24 timmar
Cellkvantitet: 1×10⁵ celler
Primär Ab-utspädning: 1:100
Primär Ab-inkubation: 4⁰C över natten
IgG Anti-Abbit - pAb
Sekundär Ab-spädning: 1:1400
Beskrivning: CUT&Tag utfördes med Anti-L-Lactyl-Histone H3 (Lys18) kanin-mAb tillsammans med normalt kanin-IgG som en negativ kontroll. Det resulterande DNA:t sekvenserades på Illumina NovaSeq-plattformen med parade slutavläsningar på 150 bp och ett sekvenseringsdjup på 3 miljoner avläsningar. Figuren visar signifikanta H3K18la-signalberikningar vid promotorregionerna CD9, PLEKHG6, LTBR och GAPDH.

Förvaring

Skickas vid 4℃. Förvaras vid -20℃ i ett år. Undvik upprepade frys-/upptiningscykler.

Obs

Endast för forskningsanvändning. Inte för diagnostisk, terapeutisk, profylaktisk eller in vivo användning.

Vanliga frågor

Vilka är huvudtyperna av forskningsantikroppar och hur skiljer de sig åt?

Forskningsantikroppar delas huvudsakligen in i monoklonala antikroppar och polyklonala antikroppar. Monoklonala antikroppar erbjuder vanligtvis högre specificitet och bättre batch-to-batch-konsistens, medan polyklonala antikroppar ofta ger starkare affinitet men kan visa mer variation mellan batcherna. Valet beror på dina specifika experimentella behov.

Hur vet jag om en forskningsantikropp är lämplig för mitt experiment?

Det rekommenderas att noggrant granska produktdatabladet för validerade tillämpningar, artreaktivitet, rekommenderade spädningar och publicerade referenser. För nya antikroppar är det vanligtvis till hjälp att utföra en liten validering med positiva kontrollprover.

Kan felaktig förvaring av forskningsantikroppar påverka experimentella resultat?

Ja. Antikroppar är känsliga för temperatur, upprepade fryscykler och kontaminering. Felaktig lagring kan leda till minskad aktivitet, ökad bakgrund eller svagare signaler. Det är bäst att följa förvaringsinstruktionerna i produktdatabladet.

Varför fungerar inte den rekommenderade utspädningen i databladet bra i mitt experiment?

Den rekommenderade utspädningen baseras på leverantörens testförhållanden. Faktorer som provtyp, fixeringsmetod och detektionssystem i ditt labb kan påverka den optimala arbetskoncentrationen. Att utföra en utspädningsserieoptimering i ditt eget system är ofta nödvändigt.

Vilka försiktighetsåtgärder ska jag vidta när jag använder en nyinköpt forskningsantikropp för första gången?

Det är lämpligt att kort centrifugera antikroppen (särskilt koncentrerade eller lyofiliserade sådana), och sedan utföra ett småskaligt pilotexperiment med de rekommenderade förhållandena. Att registrera batchnummer och användningsdatum är också användbart för framtida spårning.

Nya produkter

TRBC1 mus monoklonal antikropp (ARA662)

Mus monoklonal till TRBC1

OCT2 mus monoklonal antikropp (C2325)

Mus monoklonal antikropp mot OCT2

ARExVisual® DAB-buffert

Primärt antikroppspädningsmedel

ARExVisual® DAB kromogen (20×)

CD68 kanin monoklonal antikropp (ARA633)