Anticorpo monoclonal de coelho vimentina (ARA732)
Ficha técnica
Principais recursos e detalhes
- Alvo:
- Fonte/Hospedeiro:
- Reatividade:
- Clonalidade:
- Aplicações:
- Conjugação:
- Armazenamento:
-
Marca:
Detalhes do produto
WB | 1:5000-1:10000 |
IHQ | 1:100-1:200 |
SE/ICC | 1:2000-1:10000 |
FC | 1:10-1:200 |
IP | 1:20 |
Descrição | Anticorpo monoclonal de coelho para vimentina |
Tipo de anticorpo | Anticorpo primário |
PM previsto | 54kDa |
Imunogênio | Um péptido sintético correspondente a resíduos no terminal C da Vimentina humana foi utilizado como imunogénio. |
Purificação | IgG purificada por afinidade ProA |
Formulário/Buffer | PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,07%. |
Nomes alternativos | Vimentina |
Símbolo Genético | VIM |
Gene Entrez | 7431 (Humano) |
SwissProt | P08670 |
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Todas as pistas: Anticorpo Anti-Vimentina na diluição 1:5.000
MW previsto: 54 kDa
PM observado: 54 kDa
Pista 1: Hela
Pista 2: HEK293
Pista 3: A549
Pista 4: 3T3
Lisado a 10 μg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Exposição: 100s
Todas as pistas: Anticorpo Anti-Vimentina na diluição 1:5.000
MW previsto: 54 kDa
PM observado: 54 kDa
Pista 1: Mu Coração
Pista 2: Coração de Rato
Lisado a 10 μg por pista
2º AB:
G&R HRP(H+L) 1:10.000
Exposição: 20s
Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de cólon humano marcando vimentina com ARA732 a 1:100. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.
Histograma de sobreposição mostrando células Hela coradas com ARA732 (azul). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA732, diluição 1:10) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min a 4°C. O anticorpo secundário utilizado foi o Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min a 4°C. Amostra não marcada (Vermelho) foi usada como controle.
Coloração ARA732 com Vimentina em células Hela por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:2.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.
Controle: PBS e anticorpo secundário, um Alexa Fluor® 488-conjugado Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).
A vimentina foi imunoprecipitada a partir de 0,4 mg de lisado de Hela com ARA732 na diluição de 1:20.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500
Pista 1: ARA732 IP em lisado de células inteiras Hela
Pista 2: IgG de coelho em vez de ARA732 no lisado de células inteiras Hela
Lane3: lisado de células inteiras Hela, 10 μg (entrada)
Exposição: anos 60
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