Anticorpo monoclonal de camundongo VCP (C3825)

Análise de Western blot da expressão de VCP em lisados ​​​​de células inteiras Hela (A), K562 (B), A549 (C), C6 (D), U87 MG (E), NIH3T3 (F). (Tamanho de banda previsto: 89 kD; Tamanho de banda observado: 95 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de VCP em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de carcinoma de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração VCP em células Hela. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 555 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Análise citométrica de fluxo de células K562 usando Anticorpo Anti-VCP. As células foram fixadas com paraformaldeído a 2% (10 min) e depois permeabilizadas com metanol a 90% durante 10 min. As células foram incubadas em albumina de soro bovino a 2% para bloquear interacções não específicas entre proteína e proteína, seguidas pelo anticorpo a 37 ° C durante 60 min. O anticorpo secundário Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 foi incubado a 37 °C por 40 min. O anticorpo de controle do isotipo (linha azul) foi utilizado sob as mesmas condições.