Anticorpo monoclonal de camundongo topoisomerase 1 (C3006)

Ficha técnica

FISPQ

Topoisomerase 1 Mouse Monoclonal Antibody(C3006)

Principais recursos e detalhes

Rato monoclonal para Topoisomerase 1

Alvo: Topoisomerase 1
Fonte/Hospedeiro: Rato
Reatividade: Humano, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB, IF/ICC, FC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : AMA02618

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Libera o superenrolamento e a tensão torcional do DNA introduzida durante a replicação e transcrição do DNA, clivando e reunindo transitoriamente uma fita do duplex de DNA. Introduz uma quebra de fita simples via transesterificação em um local alvo no DNA duplex. O fosfodiéster cindível é atacado pela tirosina catalítica da enzima, resultando na formação de um intermediário enzimático de DNA-(3'-fosfotirosil)-e na expulsão de uma fita de DNA 5'-OH. A fita livre de DNA gira então em torno da ligação fosfodiéster intacta na fita oposta, removendo assim as superenrolamentos de DNA. Finalmente, na etapa de religação, o DNA 5'-OH ataca o intermediário covalente para expelir a tirosina do sítio ativo e restaurar a estrutura fosfodiéster do DNA.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
SE/ICC	1:50 - 1:200
FC	1:100 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Rato monoclonal para Topoisomerase 1
Especificidade	Reconhece níveis endógenos da proteína Topoisomerase 1
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Proteína de fusão recombinante da Topoisomerase 1 humana expressa em E. Coli
Purificação	Este anticorpo é purificado através de uma coluna de proteína G.
Peso molecular	Previsto: 91 kD; Observado: 95 kD kD
Formulário/Buffer	IgG1 de rato. Líquido em PBS, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	DNA topoisomerase 1; DNA topoisomerase I
Símbolo Genético	PRIMEIROS 1
Gene Entrez	7150(Humano); 64550(Rato)
SwissProt	P11387(Humano); Q04750(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão da Topoisomerase 1 em lisados de células inteiras HUVEC (A), Jukat (B), MCF7 (C), PC12 (D), Hela (E), NIH/3T3 (F), HCT116 (G). (Tamanho de banda previsto: 91 kD; Tamanho de banda observado: 95 kD kD)

Análise imunofluorescente da coloração da Topoisomerase 1 em células Hela. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Análise citométrica de fluxo de células HeLa usando Anticorpo Anti-Topoisomerase 1 (verde) e controle negativo (vermelho).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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