Anticorpo policlonal de coelho semáfora 4A
WB | 1:500 - 1:1000 |
IHQ | 1:50 - 1:100 |
SE/ICC | 1:50 - 1:200 |
IP | 1:10 - 1:100 |
Descrição | Anticorpo policlonal de coelho para Semaforina 4A |
Especificidade | Reconhece níveis endógenos da proteína Semaphorin 4A. |
Tipo de anticorpo | Anticorpo primário |
Imunogênio | Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região central da Semaforina 4A humana. A sequência exata é proprietária. |
Purificação | O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio. |
Peso molecular | Previsto: 83 kD; Observado: 95 kD |
Formulário/Buffer | Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio. |
Nomes alternativos | SEMAB; SEMB; Semáforina-4A; Semáforina-B; Sema B |
Símbolo Genético | SEMA4A |
Gene Entrez | 64218 (humano) |
SwissProt | Q9H3S1(Humano) |
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Análise de Western blot da expressão de Semaforina 4A em lisados de células inteiras HEK293T (A), A549 (B), SGC7901 (C). (Tamanho de banda previsto: 83 kD; Tamanho de banda observado: 95 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de Semaforina 4A em seção de tecido embebido em parafina fixada em formol de cérebro humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração de Semaforina 4A em células HeLa. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro. DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Imunoprecipitação de Semaforina 4A a partir de 0,5mg de lisado de extrato de célula inteira Jurkat, usando 5ug de Anticorpo Anti-Semaforina 4A e 50ul de esferas magnéticas de proteína G (+). Nenhum anticorpo foi adicionado ao controle (-). O anticorpo foi incubado sob agitação com esferas de Proteína G durante 10 minutos, o lisado de extrato de células inteiras Jurkat diluído em tampão RIPA foi adicionado a cada amostra e incubado durante mais 10 minutos sob agitação. As proteínas foram eluídas pela adição de 40 μl de tampão de carga SDS e incubadas durante 10 min a 70°C; 10ul de cada amostra foram separados em gel SDS PAGE, transferidos para uma membrana de nitrocelulose, bloqueados com BSA a 5% e sondados com Anticorpo Anti-Semaphorin 4A.
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