Anticorpo Policlonal de Coelho RB1 (Phospho-T821)

Ficha técnica

FISPQ

RB1 (Phospho-T821) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para RB1 (Phospho-T821)

Alvo: RB1 (Fósforo-T821)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA11034

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Supressor de tumor que é um regulador chave da transição G1/S do ciclo celular. A forma hipofosforilada liga-se aos reguladores de transcrição da família E2F, impedindo a transcrição de genes responsivos a E2F. Ambos bloqueiam fisicamente o domínio de transativação de E2Fs e recrutam enzimas modificadoras da cromatina que reprimem ativamente a transcrição. A fosforilação de RB1 dependente de ciclina e CDK induz sua dissociação de E2Fs, ativando assim a transcrição de genes responsivos a E2F e desencadeando a entrada na fase S . RB1 também promove a transição G0-G1 após fosforilação e ativação por CDK3/ciclina-C. Diretamente envolvido na formação da heterocromatina, mantendo a estrutura geral da cromatina e, em particular, a da heterocromatina constitutiva, estabilizando a metilação das histonas.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para RB1 (Phospho-T821)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína RB1 apenas quando fosforilada em T821.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam T821 da proteína RB1 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 106 kD; Observado: 120 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	Retinoblastoma-proteína associada; p105-Rb; prb; Rb; pp110
Símbolo Genético	RB1
Gene Entrez	5925(Humano); 19645(Rato); 24708 (Rato)
SwissProt	P06400(Humano); P13405(Rato); P33568(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de RB1 (Phospho-T821) em lisados de células inteiras HuT78 (A), Myla2059 (B), MCF7 (C). (Tamanho de banda previsto: 106 kD; Tamanho de banda observado: 120 kD)

Análise imunohistoquímica da coloração RB1 (Phospho-T821) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formol de testículo humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração RB1 (Phospho-T821) em células HeLa. Células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS por 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% por 30 minutos em temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado com Alexa Fluor 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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