Kit ELISA Quantitativo de Carbamilação de Proteínas
Principais recursos e detalhes
- Tipos de amostra compatíveis:
- Suporte sólido:
- Princípio de projeto:
- Método de detecção:
- Tipo de envio:
- Alvo:
-
Marca:
GATO.NÃO. : ARE6628
Por favor escolha
Por favor escolha
Tamanho:
Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco
Detalhes do produto
Descrição
O kit ELISA Quantitativo de Carbamilação de Proteínas é um kit de ensaio muito rápido, conveniente e sensível que pode monitorar os níveis totais de carbamilação de proteínas em lisados de tecidos e células. Você pode medir simultaneamente vários lisados celulares diferentes sem gastar muito tempo e esforço na realização de uma análise de Western Blotting. Este kit Sandwich ELISA é um ensaio imunoenzimático in vitro para a medição quantitativa de proteínas carbamiladas. Um anticorpo anti-pan-carbamilação foi revestido em uma placa de 96 poços. O padrão e as amostras são pipetados para os poços e a proteína carbamilada presente numa amostra é ligada aos poços pelo anticorpo imobilizado. Os poços são lavados e utiliza-se anticorpo anticarbamilação de coelho para detectar apenas proteína carbamilada. Após a lavagem do anticorpo não ligado, a IgG anti-coelho conjugada com HRP é pipetada para os poços. Os poços são lavados novamente, uma solução de substrato TMB é adicionada aos poços e a cor desenvolve-se proporcionalmente à quantidade de proteína carbamilada ligada. A solução de parada muda a cor de azul para amarelo e a intensidade da cor é medida em 450 nm.
Especificações
| Tipos de amostras compatíveis | Lisados de tecidos, lisados celulares |
|---|---|
| Quantitativo/Semi-Quantitativo | Quantitativo |
| Suporte Sólido | 96-poço Microplaca |
| Princípio de projeto | Sanduíche - à base |
| Método de detecção | Colorimétrico |
| Tipo de envio | Gelo azul |
| Armazenamento | -20℃ |
Recursos do produto
·Quantificar rapidamente a carbamilação de proteínas
·Examinar vários lisados diferentes sem realizar uma análise Western Blot
·Mínimo tempo prático, material conveniente e não radioativo
·Examinar vários lisados diferentes sem realizar uma análise Western Blot
·Mínimo tempo prático, material conveniente e não radioativo
Dados
Curva Padrão
Notas
| Componentes do kit | • Microplaca Pré-Revestida com Tira de 96-poços Anti-Carbamilação • Tampão de Lavagem • Padrão de Proteína Carbamilada • Anticorpo Anti-Carbamilação • HRP-concentrado de IgG anti-coelho conjugado • Reagente de substrato TMB One-Step • Parar solução • Diluente de Ensaio • Tampão de Lise |
|---|---|
| Outros materiais necessários | • Leitor de microplacas capaz de medir a absorbância a 450 nm • Inibidores de protease e fosfatase • Agitador • Pipetas de precisão para fornecer volumes de 2 μl a 1 ml • Pipetas ajustáveis de 1-25 μl para preparação de reagentes • Provetas graduadas de 100 ml e 1 litro • Papel absorvente • Água destilada ou deionizada • Log-log em papel milimetrado ou computador e software para análise de dados ELISA • Tubos para preparar o padrão ou diluições de amostra |
| Esboço do Protocolo | 1. Prepare todos os reagentes e amostras conforme as instruções do manual. 2. Adicione 100 μl de amostra ou controle positivo a cada poço. 3. Incubar 2,5 horas à temperatura ambiente ou O/N a 4 °C. 4. Adicione 100 μl de anticorpo primário preparado a cada poço. 5. Incubar 1 h à temperatura ambiente. 6. Adicione 100 μl de 1X HRP-Estreptavidina preparado a cada poço. 7. Incubar 1 h à temperatura ambiente. 8. Adicione 100 μl de cada padrão e amostra a cada poço. Incubar 2,5 horas à temperatura ambiente ou durante a noite a 4 °C com agitação suave. 9. Adicione 100 μl de anticorpo de detecção preparado a cada poço. Incubar durante 1 hora à temperatura ambiente com agitação suave. 10. Adicione 100 μl de solução HRP-Conjugada preparada. Incubar durante 1 hora à temperatura ambiente com agitação suave. 11. Adicione 100 μl de reagente de substrato TMB One-Step a cada poço. Incubar 30 minutos à temperatura ambiente. 12. Adicione 50 μl de solução de parada a cada poço. Leia em 450 nm imediatamente. |
Armazenamento/Estabilidade
Todo o kit pode ser armazenado a -20°C por até 6 meses a partir da data de envio. Evite ciclos repetidos de congelamento e descongelamento. Para armazenamento prolongado, recomenda-se armazenar a -80°C. Para armazenamento de reagentes preparados, consulte o manual.
Somente para uso em pesquisa
Somente para uso em pesquisa. Não deve ser usado em procedimentos de diagnóstico.
Novos produtos
