Anticorpo monoclonal de camundongo PGK1 (C3554)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo monoclonal de camundongo para PGK1

Alvo: PGK1
Fonte/Hospedeiro: Rato
Reatividade: Humano, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB, IHC, FC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : AMA03166

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Catalisa uma das duas reações produtoras de ATP na via glicolítica através da conversão reversível de 1,3-difosfoglicerato em 3-fosfoglicerato. Ambos L- e D- formas de nucleotídeos de purina e pirimidina podem ser usadas como substratos, mas a atividade é muito menor nas pirimidinas. Além de seu papel como enzima glicolítica, parece que PGK1 atua como uma proteína cofator alfa da polimerase (proteína de reconhecimento de primer). Atua como uma proteína quinase quando localizada na mitocôndria, onde fosforila a piruvato desidrogenase quinase PDK1 para inibir a atividade do complexo piruvato desidrogenase e suprimir a formação de acetil - coenzima A do piruvato e, consequentemente, inibir a fosforilação oxidativa e promover a glicólise. Pode desempenhar um papel na motilidade dos espermatozoides.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:2000
IHQ	1:50 - 1:100
FC	1:50 - 1:100

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de camundongo para PGK1
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína PGK1.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região central do PGK1 humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 44 kD; Observado: 44 kD
Formulário/Buffer	IgG2a kappa de camundongo. Líquido em PBS, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	PGKA; Fosfoglicerato quinase 1; Migração celular - proteína do gene 10 indutora; Proteína de reconhecimento de primer 2; PRP 2
Símbolo Genético	PGK1
Gene Entrez	5230(Humano); 18655 (Rato)
SwissProt	P00558(Humano); P09411 (Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de PGK1 em lisados de células inteiras HEK293T (A), A431 (B), cérebro de camundongo (C). (Tamanho de banda previsto: 44 kD; Tamanho de banda observado: 44 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de PGK1 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de rim humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Histograma de sobreposição mostrando células Jurkat coradas com Anticorpo Anti-PGK1 (linha verde). As células foram fixadas com paraformaldeído a 2% (10 min) e depois permeabilizadas com metanol a 90% durante 10 min. As células foram então icubadas em albumina de soro bovino a 2% para bloquear interações proteína-proteína não específicas seguidas de Anticorpo Anti-PGK1 por 60 min a 37°C. O anticorpo secundário utilizado foi Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 na diluição de 1/200 por 40 min a 37 °C. O anticorpo de controle do isotipo (linha azul) foi IgG2a de camundongo (1μg/1x10^6 células) usado nas mesmas condições. A aquisição de> 10.000 eventos foi realizada.

Análise de Western blot da expressão de PGK1 em lisados de células HeLa do tipo selvagem (WT) e knockdown (KD).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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