Anticorpo monoclonal de coelho PD-1 (ARA754)
Ficha técnica
Principais recursos e detalhes
- Alvo:
- Fonte/Hospedeiro:
- Reatividade:
- Clonalidade:
- Aplicações:
- Conjugação:
- Armazenamento:
-
Marca:
Detalhes do produto
WB | 1:5000-1:10000 |
IHQ | 1:100-1:200 |
SE/ICC | 1:2000-1:10000 |
FC | 1:50-1:200 |
IP | 1:50 |
Descrição | Anticorpo Monoclonal de Coelho para PD-1 |
Tipo de anticorpo | Anticorpo primário |
PM previsto | 31kDa |
Imunogênio | Proteína recombinante de comprimento total correspondente à PD-1 humana. O imunógeno contém o domínio extracelular específico de huPD-1 (L25-Q167). |
Purificação | IgG purificada por afinidade ProA |
Formulário/Buffer | PBS 59%, azida de sódio 0,01%, glicerol 40%, BSA 0,29%. |
Nomes alternativos | PD1; Proteína 1 de morte celular programada; Proteína PD-1; hPD-1; CD279 |
Símbolo Genético | PDCD1 |
Gene Entrez | 5133 (Humano) |
SwissProt | Q15116 |
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.
Todas as pistas: Anticorpo Anti-PD-1 na diluição 1:5.000
MW previsto: 31 kDa
PM observado: 40-50 kDa
Pista 1: 293 Superexpressão de HuPD-1
Pista 2: 293 sem HuPD-1
Lisados a 5 µg por pista
2º AB:
GARHRP(H+L) 1:1.000
Exposição: 120s
Análise imuno-histoquímica (formalina/PFA - parafina fixa - seções incorporadas) de tecido de tonsila pulmonar humana marcando PD - 1 com ARA754 a 1:200. A recuperação antigênica mediada por calor foi realizada utilizando tampão Tris/EDTA pH 9,0.
ARA754 coloração PD-1 em 293 células transfectadas com gene PD-1 por IF/ICC (imunofluorescência/imunocitoquímica). As células foram fixadas com paraformaldeído, permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% e bloqueadas com soro de cabra a 10% durante meia hora à temperatura ambiente. As amostras foram incubadas com anticorpo primário (1:10.000) a 4°C. Um policlonal IgG de cabra anti-coelho conjugado com Alexa Fluor® 488- foi usado como anticorpo secundário (1:500). DAPI (azul) foi usado como contra-coloração nuclear.
Controle: PBS e anticorpo secundário, An Alexa Fluor® 488-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).
Histograma de sobreposição mostrando 293 células transfectadas com o gene PD-1 coradas com ARA754 (Azul). As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% (10 min) e depois permeabilizadas com TritonX - 100 a 0,1% durante 15 min. As células foram então incubadas no anticorpo (ARA754, diluição 1:200) em 1x PBS/BSA a 1% durante 30 min à temperatura ambiente. O anticorpo secundário utilizado foi um Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) na diluição 1:2.000 por 20 min em temperatura ambiente. Amostra não marcada (Vermelho) foi usada como controle.
PD-1 foi imunoprecipitado a partir de 0,2 mg de lisado de células inteiras 293 transfectadas com gene PD-1 com ARA754 na diluição de 1:50.
2º AB:
GAR HRP para IP 1:500
Pista 1: ARA754 IP em lisado de células inteiras 293 transfectadas com gene PD-1
Pista 2: PBS em vez de ARA754 em lisado de células inteiras 293 transfectadas com gene PD-1
Pista 3: 293 lisado de células inteiras transfectadas com gene PD-1, 2 μg (entrada)
Exposição: 10s
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