Anticorpo monoclonal de camundongo PCNA (C3671)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo monoclonal de camundongo para PCNA

Alvo: PCNA
Fonte/Hospedeiro: Rato
Reatividade: Humano
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB, IHC, FC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : AMA03283

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Confere ligação de DNA e processabilidade a DNA polimerases e outras proteínas. Proteína auxiliar da DNA polimerase delta e épsilon, está envolvida no controle da replicação do DNA, aumentando a processabilidade das polimerases durante o alongamento da fita principal. Induz um efeito estimulador robusto na exonuclease 3'-5' e 3'-fosfodiesterase, mas não na endonuclease apurínica-apirimidínica (AP), atividades APEX2. Tem que ser carregado no DNA para poder estimular o APEX2. Desempenha um papel fundamental na resposta a danos no DNA (DDR), sendo convenientemente posicionado na bifurcação de replicação para coordenar a replicação do DNA com o reparo do DNA e as vias de tolerância a danos no DNA.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:100 - 1:500
FC	1:10 - 1:50

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de camundongo para PCNA
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína PCNA.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Proteína de fusão recombinante de PCNA humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	Este anticorpo é purificado através de uma coluna de proteína G.
Peso molecular	Previsto: 28 kD; Observado: 35 kD
Formulário/Buffer	IgG1 kappa de camundongo. Líquido em PBS, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	Antígeno nuclear de células em proliferação; PCNA; Ciclina
Símbolo Genético	PCNA
Gene Entrez	5111 (Humano)
SwissProt	P12004(Humano)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de PCNA em lisados de células inteiras HepG2 (A), A431 (B). (Tamanho de banda previsto: 28 kD; Tamanho de banda observado: 35 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de PCNA em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de ovário humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise citométrica de fluxo de células Hela usando Anticorpo Anti-PCNA. As células foram fixadas com paraformaldeído a 2% (10 min) e depois permeabilizadas com metanol a 90% durante 10 min. As células foram incubadas em albumina de soro bovino a 2% para bloquear interações proteína-proteína não específicas seguidas pelo anticorpo a 37 ° C durante 60 min. O anticorpo secundário Goat Anti-Mouse IgG (H&L) - AREX® Fluor 488 foi incubado a 37 °C por 40 min. O anticorpo de controle do isotipo (linha azul) foi utilizado sob as mesmas condições.

Análise de Western blot da expressão de PCNA em lisados de células HeLa do tipo selvagem (WT) e knockdown (KD).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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