Anticorpo policlonal de coelho PAK4 (Phospho-S474)

Ficha técnica

FISPQ

PAK4 (Phospho-S474) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para PAK4 (Phospho-S474)

Alvo: PAK4 (Fósforo-S474)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA07922

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Serina/treonina-proteína quinase que desempenha um papel em uma variedade de diferentes vias de sinalização, incluindo regulação do citoesqueleto, renovação de adesão celular, migração celular, crescimento, proliferação ou sobrevivência celular. A ativação por vários efetores, incluindo receptores de fator de crescimento ou CDC42 e RAC1 ativos, resulta em uma mudança conformacional e uma autofosforilação subsequente em vários resíduos de serina e/ou treonina. Fosforila e inativa a proteína fosfatase SSH1, levando ao aumento da fosforilação inibitória do fator de ligação/despolimerização da actina cofilina. A diminuição da atividade da cofilina pode levar à estabilização dos filamentos de actina. Fosforila LIMK1, uma quinase que também inibe a atividade da cofilina. Fosforila a integrina beta5/ITGB5 e, assim, regula a motilidade celular.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para PAK4 (Phospho-S474)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína PAK4 apenas quando fosforilada em S474.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam S474 da proteína PAK4 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 64 kD; Observado: 72 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	KIAA1142; Serina/treonina-proteína quinase PAK 4; p21 - quinase 4 ativada; PAK-4
Símbolo Genético	PAK4
Gene Entrez	10298(Humano); 70584 (Rato)
SwissProt	O96013(Humano); Q8BTW9 (Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de PAK4 (Phospho-S474) em lisados de células inteiras de PC3 (A), MCF7 (B), NIH3T3 (C), PC12 (D). (Tamanho de banda previsto: 64 kD; Tamanho de banda observado: 72 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de PAK4 (Phospho - S474) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de carcinoma de próstata humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração PAK4 (Phospho-S474) em células Raw264.7. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro. DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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