Anticorpo policlonal de coelho PAK4/5

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para PAK4/5

Alvo: PAK4/5
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Bovino
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: WB, IHC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA11069

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Serina/treonina-proteína quinase que desempenha um papel em uma variedade de diferentes vias de sinalização, incluindo regulação do citoesqueleto, renovação de adesão celular, migração celular, crescimento, proliferação ou sobrevivência celular. A ativação por vários efetores, incluindo receptores de fator de crescimento ou CDC42 e RAC1 ativos, resulta em uma mudança conformacional e uma autofosforilação subsequente em vários resíduos de serina e/ou treonina. Fosforila e inativa a proteína fosfatase SSH1, levando ao aumento da fosforilação inibitória do fator de ligação/despolimerização da actina cofilina. A diminuição da atividade da cofilina pode levar à estabilização dos filamentos de actina. Fosforila LIMK1, uma quinase que também inibe a atividade da cofilina. Fosforila a integrina beta5/ITGB5 e, assim, regula a motilidade celular.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para PAK4/5
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína PAK4/5.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região C - term da PAK4/5 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 64; Observado: 72 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	KIAA1142; Serina/treonina-proteína quinase PAK 4; p21 - quinase 4 ativada; PAK-4
Símbolo Genético	PAK4; PAK5
Gene Entrez	10298(Humano); 70584 (Rato)
SwissProt	O96013; Q9P286(Humano); Q8BTW9 (Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de PAK4/5 em lisados de células inteiras C6 (A), CT26 (B), A2780 (C), HCT116 (D), PC3 (E). (Tamanho de banda previsto: 64; 80 kD; Tamanho de banda observado: 72 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração PAK4/5 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunocitoquímica da coloração PAK4/5 em células HepG2. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado com HRP em PBS à temperatura ambiente. DAB foi usado como cromógeno.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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