p21 (Phospho-T145) Anticorpo Policlonal de Coelho

Ficha técnica

FISPQ

p21 (Phospho-T145) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para p21 (Phospho-T145)

Alvo: p21 (Fósforo-T145)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, bovino, cão, ovelha
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA09170

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Desempenha um papel importante no controle da progressão do ciclo celular e na parada G2 induzida por danos ao DNA. Envolvido na inibição da proliferação celular mediada por p53/TP53 em resposta a danos no DNA. Também envolvido na parada G2 induzida por p53 - dano independente ao DNA mediada por CREB3L1 em astrócitos e osteoblastos. Liga-se e inibe a atividade da quinase dependente de ciclina, prevenindo a fosforilação de substratos críticos de quinase dependente de ciclina e bloqueando a progressão do ciclo celular. Atua na localização nuclear e montagem do complexo ciclina D - CDK4 e promove sua atividade quinase em relação ao RB1. Em proporções estequiométricas mais elevadas, inibe a atividade quinase do complexo ciclina D-CDK4. Inibe a síntese de DNA pela DNA polimerase delta ao competir com o POLD3 pela ligação ao PCNA.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:100 - 1:200
SE/ICC	1:100 - 1:500

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para p21 (Phospho-T145)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína p21 apenas quando fosforilada em T145.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopéptido sintético conjugado com KLH correspondendo aos resíduos que rodeiam T145 da proteína p21 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 18 kD; Observado: 21 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	CAP20; CDKN1; CIP1; MDA6; PIC1; IDE1; WAF1; inibidor de quinase dependente de ciclina 1; proteína interagente CDK 1; Diferenciação do melanoma - proteína 6 associada; MDA-6; pág.21
Símbolo Genético	CDKN1A
Gene Entrez	1026 (Humano)
SwissProt	P38936 (Humano)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de p21 (Phospho-T145) em lisados de células inteiras tratadas com HT1080 EGF-(A), HeLa EGF-tratadas (B). (Tamanho de banda previsto: 18 kD; Tamanho de banda observado: 21 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração de p21 (Phospho - T145) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de próstata humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração p21 (Phospho-T145) em células HeLa. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara escondida. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Curva de dose-resposta de anticorpo ELISA direta usando Anticorpo Anti-p21 (Phospho-T145). A concentração de antígeno (fosfopeptídeo e não fosfopeptídeo) é de 5 ug/ml. Anti-IgG de Cabra-Coelho (H&L) - O HRP foi utilizado como anticorpo secundário e o sinal foi desenvolvido pelo substrato TMB.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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