NF-kappaB p65 (Phospho-S536) Anticorpo Policlonal de Coelho

Ficha técnica

FISPQ

NF-kappaB p65 (Phospho-S536) Rabbit Polyclonal Antibody

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para NF-kappaB p65 (Phospho-S536)

Alvo: NF-kappaB p65 (Fósforo-S536)
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Macaco, Porco
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: WB, IHC, IF/ICC, IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA07495

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

NF-kappa-B é um fator de transcrição pleiotrópico presente em quase todos os tipos de células e é o ponto final de uma série de eventos de transdução de sinal que são iniciados por uma vasta gama de estímulos relacionados a muitos processos biológicos, como inflamação, imunidade, diferenciação, crescimento celular, tumorigênese e apoptose. NF-kappa-B é um homo- ou complexo heterodimérico formado pelas proteínas contendo domínio semelhante a Rel RELA/p65, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL e NFKB2/p52. O complexo heterodimérico RELA - NFKB1 parece ser o mais abundante. Os dímeros ligam-se aos locais kappa-B no DNA dos seus genes alvo e os dímeros individuais têm preferências distintas para diferentes locais kappa-B aos quais podem se ligar com afinidade e especificidade distinguíveis.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:200
SE/ICC	1:50 - 1:200
IP	1:10 - 1:100

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para NF-kappaB p65 (Phospho-S536)
Especificidade	Reconhece níveis endógenos da proteína NF-kappaB p65 somente quando fosforilada em S536.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Fosfopeptídeo sintético conjugado com KLH correspondente aos resíduos que circundam S536 da proteína NF - kappaB p65 humana. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 60 kD; Observado: 75 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	NFKB3; Fator de transcrição p65; Subunidade p65 do fator nuclear NF-kappa-B; Fator nuclear do intensificador do gene do polipeptídeo leve kappa em células B -
Símbolo Genético	RELA
Gene Entrez	5970(Humano); 19697 (Rato)
SwissProt	Q04206(Humano); Q04207(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de NF-kappaB p65 (Phospho-S536) em lisados de células inteiras Hela (A), HEK293T (B), NIH3T3 (C), rim de camundongo (D), H9C2 (E). (Tamanho de banda previsto: 60 kD; Tamanho de banda observado: 75 kD)

Análise imunohistoquímica da coloração de NF-kappaB p65 (Phospho-S536) em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração NF-kappaB p65 (Phospho-S536) em pulmão de rato. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A seção foi então incubada com o anticorpo em temperatura ambiente e detectada usando um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 594-(vermelho) em PBS em temperatura ambiente no escuro. DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Curva de dose-resposta de anticorpo ELISA direta usando Anticorpo Anti-NF-kappaB p65 (Phospho-S536). A concentração de antígeno (fosfopeptídeo e não fosfopeptídeo) é de 5 ug/ml. Anti-IgG de Cabra-Coelho (H&L) - O HRP foi utilizado como anticorpo secundário e o sinal foi desenvolvido pelo substrato TMB.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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