Anticorpo Policlonal de Coelho mTOR

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo policlonal de coelho para mTOR

Alvo: mTOR
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato, Ovelha
Clonalidade: Policlonal
Aplicações: BM, IHC, IF/ICC
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : APA06996

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Proteína quinase serina/treonina que é um regulador central do metabolismo celular, crescimento e sobrevivência em resposta a hormônios, fatores de crescimento, nutrientes, energia e sinais de estresse. O MTOR regula direta ou indiretamente a fosforilação de pelo menos 800 proteínas. Funciona como parte de 2 complexos de sinalização estrutural e funcionalmente distintos mTORC1 e mTORC2 (complexo mTOR 1 e 2). Em resposta a nutrientes, fatores de crescimento ou aminoácidos, o mTORC1 é recrutado para a membrana do lisossoma e promove a síntese de proteínas, lipídios e nucleotídeos através da fosforilação dos principais reguladores da tradução do mRNA e da síntese do ribossomo . Isto inclui a fosforilação de EIF4EBP1 e a liberação de sua inibição em direção ao fator de iniciação de alongamento 4E (eiF4E).

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:1000
IHQ	1:50 - 1:100
SE/ICC	1:50 - 1:200

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo policlonal de coelho para mTOR
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína mTOR.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário
Imunogênio	Peptídeo sintético conjugado com KLH - abrangendo uma sequência dentro da região C - term do mTOR humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 288 kD; Observado: 289 kD
Formulário/Buffer	Líquido em 0,42% de fosfato de potássio, 0,87% de cloreto de sódio, pH 7,3, 30% de glicerol e 0,01% de azida de sódio.
Nomes alternativos	FRAP; FRAP1; FRAP2; JANGADA1; RAPT1; Serina/treonina-proteína quinase mTOR; FK506-proteína de ligação 12-complexo de rapamicina-proteína associada 1; FKBP12-complexo de rapamicina-proteína associada; Alvo da rapamicina em mamíferos; mTOR; Alvo mecanístico da rapamicina; Rapamicina e FKBP12 alvo 1; Proteína alvo 1 da rapamicina
Símbolo Genético	MTOR
Gene Entrez	2475(Humano); 56717(Rato); 56718 (Rato)
SwissProt	P42345(Humano); Q9JLN9(Rato); P42346(Rato)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de mTOR em lisados de células inteiras HepG2 (A), MCF7 (B), H9C2 (C), AML12 (D). (Tamanho de banda previsto: 288 kD; Tamanho de banda observado: 289 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração mTOR em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de câncer de mama humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração mTOR em células MCF7. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado DyLight 594-(vermelho) em PBS à temperatura ambiente no escuro.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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