Kit IL-6 ELISA para ratos

A interleucina 6 (IL-6) é uma citocina pleiotrópica, a-helicoidal, 22-28 kDa fosforilada e variavelmente glicosilada que desempenha papéis importantes na reação de fase aguda, inflamação, hematopoiese, metabolismo ósseo e progressão do câncer. A IL-6 humana madura tem 183 aminoácidos (aa) de comprimento e compartilha 39% de identidade de sequência aa com a IL-6 de camundongo e rato. O splicing alternativo gera diversas isoformas com deleções internas, algumas das quais exibem propriedades antagônicas. As células conhecidas por expressarem IL - eosinófilos, células epiteliais do cólon, células B1 B e células beta das ilhotas pancreáticas. A produção de IL-6 está geralmente correlacionada com a ativação celular e normalmente é mantida sob controle por glicocorticóides, catecolaminas e esteróides sexuais secundários. A IL-6 circulante humana normal está na faixa de 1 pg/mL, com leves elevações durante o ciclo menstrual, elevações modestas em certos tipos de câncer e grandes elevações após a cirurgia. - IL-6 induz sinalização através de um complexo receptor heterodimérico de superfície celular composto por uma subunidade de ligação ao ligante (IL-6 R alfa) e uma subunidade de transdução de sinal (gp130). IL-6 liga-se a IL-6 Ra, desencadeando associação de IL-6 Ra com gp130 e dimerização de gp130. gp130 também é um componente dos receptores para CLC, CNTF, CT-1, IL-11, IL-27, LIF e OSM. Formas solúveis de IL-6 Ra são geradas tanto por splicing alternativo quanto por clivagem proteolítica. Em um mecanismo conhecido como sinalização trans, complexos de IL-6 e IL-6 Ra solúveis provocam respostas de células que expressam gp130-que não possuem IL-6 Ra na superfície celular. A sinalização trans- permite que uma gama mais ampla de tipos de células respondam à IL-6, já que a expressão de gp130 é onipresente, enquanto a de IL-6 Ra é predominantemente restrita a hepatócitos, monócitos e linfócitos em repouso. Formas de splice solúveis de gp130 bloqueiam a trans-sinalização de IL-6/IL-6 Ra, mas não de outras citocinas que usam gp130 como co-receptor. - A IL-6, juntamente com o TNF-a e a IL-1, impulsiona a resposta inflamatória aguda. A IL-6 é quase exclusivamente responsável pela febre e pela resposta de fase aguda no fígado, e é importante na transição da inflamação aguda para a imunidade adquirida ou para a doença inflamatória crónica. Quando desregulado, contribui para a inflamação crônica em condições como obesidade, resistência à insulina, doença inflamatória intestinal, artrite e sepse. A IL-6 modula a reabsorção óssea e é um importante efetor da destruição inflamatória das articulações na artrite reumatóide através da promoção do desenvolvimento e atividade das células Th17. Contribui para o desenvolvimento e desestabilização da placa aterosclerótica, bem como para o desenvolvimento de carcinogênese associada à inflamação.

pg/ml	OD		Média	Corrigido
0.00	0.0224	0.0228	0.0226
1.37	0.0267	0.0253	0.0260	0.0034
4.12	0.0359	0.0351	0.0355	0.0129
12.35	0.0665	0.0635	0.0650	0.0424
37.04	0.1438	0.1432	0.1435	0.1209
111.11	0.3781	0.3824	0.3803	0.3577
333.33	1.0371	0.9801	1.0086	0.9860
1000.00	2.7831	2.7443	2.7637	2.7411

	Precisão intra-ensaio			Precisão Inter-ensaio
Número da amostra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Média (pg/ml)	18.9	112.8	346.8	19.2	111.5	346.5
Desvio Padrão	0.6	3.7	10.9	0.9	5.1	8.3
Coeficiente de Variação (%)	3.1	3.3	3.1	4.9	4.6	2.4

Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de IL-6 de camundongo em amostra de soro de camundongo saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.

A recuperação variou de 89% a 118%, com uma recuperação média global de 104%.

Matriz de Amostra	Amostra avaliada	Faixa (pg/ml)	Detectável (%)	Média de detectável (pg/ml)
Soro	30	n.d.-15.85	88	2.71

Soro/Plasma – Trinta amostras de camundongos aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de TNF alfa neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.

s.d. = não-detectável. Amostras medidas abaixo da sensibilidade são consideradas não detectáveis.