Anticorpo monoclonal de coelho Ki67 (C1956)

Ficha técnica

FISPQ

Principais recursos e detalhes

Anticorpo monoclonal de coelho recombinante para Ki67

Alvo: Ki67
Fonte/Hospedeiro: Coelho
Reatividade: Humano, Rato, Rato
Clonalidade: Monoclonal
Aplicações: WB, IHC, IF/ICC, IP
Conjugação: Não conjugado
Armazenamento: a-20°C

Marca:

GATO.NÃO. : AMA01568

US$ Por favor escolha

Tamanho:

50μL 100μL

Trilha, tamanho em massa ou solicitações personalizadas entre em contato conosco

Detalhes do produto

Plano de fundo

Proteína que se associa à superfície dos cromossomos mitóticos e atua tanto como repelente cromossômico durante a mitose inicial quanto como atrativo cromossômico durante a mitose tardia. Necessário para manter cromossomos mitóticos individuais dispersos no citoplasma após a desmontagem do envelope nuclear. Durante a mitose inicial, relocaliza-se dos nucléolos para a superfície do cromossomo, onde forma estruturas em escova estendidas que cobrem uma fração substancial da superfície do cromossomo. A estrutura em escova MKI67 evita que os cromossomos colapsem em uma única massa de cromatina, formando uma barreira de carga estérica e eletrostática: a proteína tem uma alta carga elétrica líquida e atua como um surfactante, dispersando os cromossomos e permitindo a motilidade cromossômica independente.

Aplicação

Para garantir o desempenho ideal do ensaio, a AREX recomenda a realização de titulação de reagentes adaptada a cada sistema de teste para obter resultados de detecção ideais.

WB	1:500 - 1:2000
IHQ	1:100 - 1:300
SE/ICC	1:100 - 1:300
IP	1:50 - 1:100

*Os resultados são específicos da amostra. Consulte as condições de ensaio locais e os parâmetros de teste para referência.

Visão geral

Descrição	Anticorpo monoclonal de coelho recombinante para Ki67
Especificidade	Reconhece níveis endógenos de proteína Ki67.
Tipo de anticorpo	Anticorpo primário, recombinante
Imunogênio	Proteína de fusão recombinante de Ki67 humano. A sequência exata é proprietária.
Purificação	O anticorpo foi purificado por cromatografia de afinidade de imunogénio.
Peso molecular	Previsto: 358 kD; Observado: 358 kD
Formulário/Buffer	Líquido em PBS, pH 7,3, 50% de glicerol, 0,05% de BSA e 0,05% de Proclin300.
Nomes alternativos	Antígeno KI-67
Símbolo Genético	MKI67
Gene Entrez	4288 (Humano)
SwissProt	P46013(Humano)

*AREX otimiza continuamente nossos produtos. O conteúdo da página da Web pode não refletir as atualizações mais recentes. Para dúvidas, entre em contato com info@arexbio.com ou com seu distribuidor local.
*Número do clone, reatividade, origem/host e clonalidade podem ser encontrados no nome do produto e na seção de recursos principais acima.

Dados

Análise de Western blot da expressão de Ki67 em lisados de células inteiras Hela (A). (Tamanho de banda previsto: 358 kD; Tamanho de banda observado: 358 kD)

Análise imuno-histoquímica da coloração Ki67 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de cólon humano. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Análise imunofluorescente da coloração Ki67 em células Hela. As células fixadas em formalina foram permeabilizadas com Triton X-100 a 0,1% em TBS durante 5-10 minutos e bloqueadas com BSA-PBS a 3% durante 30 minutos à temperatura ambiente. As células foram sondadas com o anticorpo primário em 3% de BSA - PBS e incubadas durante a noite a 4 ° C numa câmara humidificada. As células foram lavadas com PBST e incubadas com um anticorpo secundário conjugado AREX® Fluor 488 -(verde) em PBS à temperatura ambiente no escuro. Faloidina - AREX® Fluor 594 foi usado para colorir os filamentos de actina (vermelho). DAPI foi usado para corar os núcleos das células (azul).

Análise imuno-histoquímica da coloração Ki67 em seção de tecido embebido em parafina fixada em formalina de tumor de camundongo. A seção foi pré-tratada usando recuperação antigênica mediada por calor com tampão citrato de sódio (pH 6,0). A secção foi então incubada com o anticorpo à temperatura ambiente e detectada utilizando um sistema de polímero compacto conjugado com HRP. DAB foi usado como cromógeno. A seção foi então contrastada com hematoxilina e montada com DPX.

Armazenamento

Armazenar a 4°C por curto prazo. Para armazenamento de longo prazo, armazene a -20°C, evitando ciclos de congelamento/descongelamento.

Nota

Somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico, terapêutico, profilático ou in vivo.

Perguntas frequentes

Quais são os principais tipos de anticorpos de pesquisa e como eles diferem?

Os anticorpos de pesquisa são divididos principalmente em anticorpos monoclonais e anticorpos policlonais. Os anticorpos monoclonais normalmente oferecem maior especificidade e melhor consistência entre lotes, enquanto os anticorpos policlonais geralmente fornecem uma afinidade mais forte, mas podem mostrar mais variação entre os lotes. A escolha depende de suas necessidades experimentais específicas.

Como posso saber se um anticorpo de pesquisa é adequado para meu experimento?

Recomenda-se revisar cuidadosamente a ficha técnica do produto para aplicações validadas, reatividade de espécies, diluições recomendadas e referências publicadas. Para novos anticorpos, geralmente é útil realizar uma validação em pequena escala com amostras de controle positivo.

O armazenamento inadequado de anticorpos de pesquisa pode afetar os resultados experimentais?

Sim. Os anticorpos são sensíveis à temperatura, ciclos repetidos de congelamento/descongelamento e contaminação. O armazenamento inadequado pode levar à redução da atividade, aumento do fundo ou sinais mais fracos. É melhor seguir as instruções de armazenamento fornecidas na ficha técnica do produto.

Por que a diluição recomendada na folha de dados não funciona bem no meu experimento?

A diluição recomendada é baseada nas condições de teste do fornecedor. Fatores como tipo de amostra, método de fixação e sistema de detecção em seu laboratório podem influenciar a concentração ideal de trabalho. Muitas vezes é necessário realizar uma otimização em série de diluições em seu próprio sistema.

Que precauções devo tomar ao usar pela primeira vez um anticorpo de pesquisa recém-adquirido?

É aconselhável centrifugar brevemente o anticorpo (especialmente os concentrados ou liofilizados) e, em seguida, realizar um experimento piloto em pequena escala usando as condições recomendadas. Registrar o número do lote e a data de uso também é útil para rastreamento futuro.

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