Kit VEGF ELISA humano

O fator de crescimento endotelial vascular (VEGF ou VEGF-A), também conhecido como fator de permeabilidade vascular (VPF), é um potente mediador da angiogênese e da vasculogênese no feto e no adulto. É um membro da família PDGF que é caracterizado pela presença de oito resíduos de cisteína conservados em uma estrutura de nó de cistina e pela formação de dímeros ligados por dissulfeto antiparalelos. Os humanos expressam isoformas de splicing alternado de 121, 145, 165, 183, 189 e 206 aminoácidos (aa) de comprimento. VEGF165 parece ser a isoforma mais abundante e potente, seguida por VEGF121 e VEGF189. Outras isoformas além do VEGF121 contêm regiões básicas de ligação à heparina e não são livremente difusíveis. O VEGF165 humano partilha 88% de identidade de sequência aa com regiões correspondentes de VEGF de ratinho e rato. O VEGF é expresso em múltiplas células e tecidos, incluindo músculo esquelético e cardíaco, hepatócitos, osteoblastos, neutrófilos, macrófagos, queratinócitos, tecido adiposo marrom, células-tronco CD34+, células endoteliais, fibroblastos e células musculares lisas vasculares. A expressão de VEGF é induzida por hipóxia e citocinas como IL-1, IL-6, IL-8, oncostatina M e TNF-alfa. As isoformas do VEGF são expressas diferencialmente durante o desenvolvimento e no adulto. - Os dímeros de VEGF ligam-se a dois receptores de tirosina quinases relacionados, VEGF R1 (também chamado Flt-1) e VEGF R2 (Flk-1/KDR), e induzem sua homodimerização e autofosforilação. Esses receptores possuem sete domínios extracelulares semelhantes à imunoglobulina e um domínio intracelular de tirosina quinase dividido. Eles são expressos em células endoteliais vasculares e em uma variedade de células não endoteliais. Embora a afinidade do VEGF seja mais elevada para a ligação ao VEGF R1, o VEGF R2 parece ser o mediador primário da actividade angiogénica do VEGF. O VEGF165 também se liga ao receptor de semaforina, neuropilina-1, que promove a formação de complexos com VEGF R2. - O VEGF é mais conhecido por seu papel na vasculogênese. Durante a embriogênese, o VEGF regula a proliferação, migração e sobrevivência das células endoteliais, regulando assim a densidade e o tamanho dos vasos sanguíneos, mas não desempenhando nenhum papel na determinação dos padrões vasculares. O VEGF promove a formação óssea através do recrutamento de osteoblastos e condroblastos e também é um quimioatraente de monócitos. Após o nascimento, o VEGF mantém a integridade das células endoteliais e é um potente mitógeno para micro- e células endoteliais macro-vasculares. Em adultos, o VEGF atua principalmente na cicatrização de feridas e no ciclo reprodutivo feminino. Em tecidos doentes, o VEGF promove a permeabilidade vascular. Pensa-se, portanto, que contribui para a metástase tumoral, promovendo tanto o extravasamento como a angiogénese tumoral. Várias estratégias têm sido empregadas terapeuticamente para antagonizar a angiogênese tumoral mediada por VEGF. Os níveis circulantes de VEGF correlacionam-se com a atividade da doença em doenças autoimunes, como artrite reumatóide, esclerose múltipla e lúpus eritematoso sistêmico.

pg/ml	OD		Média	Corrigido
0.00	0.0275	0.0264	0.0270
31.25	0.1190	0.1082	0.1136	0.0867
62.50	0.1991	0.2040	0.2016	0.1746
125.00	0.3159	0.2863	0.3011	0.2742
250.00	0.5521	0.6045	0.5783	0.5514
500.00	1.1560	1.2260	1.1910	1.1641
1000.00	2.3170	2.2130	2.2650	2.2381
2000.00	3.6280	3.4990	3.5635	3.5366

	Precisão intra-ensaio			Precisão Inter-ensaio
Número da amostra	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
Média（pg/ml）	53.2	229.1	694.5	31.6	160.6	438.1
Desvio padrão	3.6	13.3	38.4	2.1	8.2	13.6
Coeficiente de variação（%）	6.8	5.8	5.5	6.5	5.1	3.1

Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.

A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de VEGF/VEGFA humano em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.

A recuperação variou de 94% a 119%, com uma recuperação média global de 105%.

Matriz de Amostra	Amostra Avaliado	Alcance (pg/ml)	Detectável %	Média de detectável (pg/ml)
Soro	30	25,21-450,32	100.0	185.52

Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de VEGF neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.