Kit ELISA TPO/Trombopoietina Humana
GATO.NÃO. : AEH0197
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Plano de fundo
A trombopoietina (Tpo) é um regulador chave da megacariocitopoiese e da trombopoiese. É produzido principalmente no fígado e é ligado e internalizado pelo receptor Tpo R/c-mpl. Defeitos na via de sinalização Tpo-Tpo R estão associados a uma variedade de distúrbios plaquetários. O precursor de Tpo de camundongo de 356 aminoácidos (aa) é clivado para produzir a proteína madura de 335 aa. A Tpo de camundongo maduro compartilha 71% e 81% de homologia de sequência aa com Tpo humana e de rato, respectivamente. É uma proteína de 80-85 kDa que consiste em um domínio N-terminal com homologia com a Eritropoietina (Epo) e um domínio C-terminal que contém múltiplos sítios de glicosilação ligados a N- e O-. O splicing alternativo específico do tecido do Tpo de camundongo gera múltiplas isoformas com deleções internas, inserções e/ou substituições C-terminais. Tpo promove a diferenciação, proliferação e maturação de MK e seus progenitores. Várias outras citocinas também podem promover estas funções, mas apenas em cooperação com a Tpo. Notavelmente, a IL-3 induz independentemente o desenvolvimento de MK, embora os seus efeitos sejam restritos ao início da linhagem MK. A Tpo promove adicionalmente a produção, agregação, adesão e ativação da MEC de plaquetas. É clivado pela trombina derivada de plaquetas seguindo Arg191 dentro do domínio C-terminal e subsequentemente em outros locais após digestão prolongada. Tpo completo e formas mais curtas circulam no plasma. O domínio C-terminal não é necessário para a ligação ao Tpo R ou para induzir o crescimento e diferenciação do MK. Além de seus efeitos hematopoiéticos, a Tpo é expressa no cérebro, onde promove a apoptose de neurônios sensibilizados por hipóxia e inibe a diferenciação neuronal ao bloquear a sinalização induzida por NGF.
Dados típicos
|
pg/ml |
OD |
Média |
Corrigido |
|
|
0.00 |
0.0260 |
0.0252 |
0.0256 |
|
|
8.19 |
0.0460 |
0.0467 |
0.0464 |
0.0208 |
|
20.48 |
0.0769 |
0.0723 |
0.0746 |
0.0490 |
|
51.20 |
0.1445 |
0.1427 |
0.1436 |
0.1180 |
|
128.00 |
0.3214 |
0.3069 |
0.3142 |
0.2886 |
|
320.00 |
0.6924 |
0.6953 |
0.6939 |
0.6683 |
|
800.00 |
1.6190 |
1.5460 |
1.5825 |
1.5569 |
|
2000.00 |
3.2320 |
3.2120 |
3.2220 |
3.1964 |
Precisão
|
Precisão intra-ensaio |
Precisão Inter-ensaio |
|||||
|
Número da amostra |
S1 |
S2 |
S3 |
S1 |
S2 |
S3 |
|
22 |
22 |
22 |
6 |
6 |
6 |
|
|
Média (pg/ml) |
40.7 |
197.2 |
578.0 |
37.2 |
208.0 |
617.8 |
|
Desvio Padrão |
2.9 |
9.9 |
34.8 |
2.4 |
11.7 |
41.3 |
|
Coeficiente de Variação (%) |
7.1 |
5.0 |
6.0 |
6.5 |
5.6 |
6.7 |
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Recuperação de pico
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de TPO/Trombopoietina humana em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 88% a 128%, com uma recuperação média global de 114%.
A recuperação variou de 88% a 128%, com uma recuperação média global de 114%.
Valores de amostra
| Matriz de Amostra | Amostra avaliada | Faixa (pg/ml) | Detectável (%) | Média de detectável (pg/ml) |
|---|---|---|---|---|
| Soro | 30 | 5,60-1005,88 | 100 | 253.32 |
Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de TPO/Trombopoietina neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.
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