Kit ELISA PD-L1/B7-H1 humano
Livreto de Protocolo
Principais recursos e detalhes
- Especificação:
- Sensibilidade:
- Faixa de curva padrão:
- Gradiente de curva padrão:
- Número de incubações:
- Volume de amostra:
- Tipo de ensaio:
- Duração da Operação:
-
Marca:
GATO.NÃO. : AEH0048
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Tamanho:
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Detalhes do produto
Plano de fundo
O homólogo B7 humano 1 (B7 - H1), também chamado de ligante 1 de morte programada (PD - L1) e ligante 1 de morte celular programada 1 (PDCD1L1), é um membro da crescente família B7 de proteínas imunológicas que fornecem sinais para estimular e inibir a ativação de células T. Outros membros da família incluem B7-1, B7-2, B7-H2, PDL2 e B7-H3. As proteínas B7 são membros da superfamília das imunoglobulinas (Ig). Seus domínios extracelulares contêm 2 domínios semelhantes a Ig e todos os membros possuem domínios citoplasmáticos curtos. Entre os membros da família, há cerca de 20-25% de identidade de aminoácidos. H1 humana e de camundongo compartilham aproximadamente 70% de identidade de sequência de aminoácidos. B7-H1 foi identificado como um dos dois ligantes para morte programada-1 (PD-1), um membro da família de imunorreceptores CD28. O gene B7 - H1 codifica uma proteína precursora de membrana tipo I de 291 aminoácidos (aa) com um suposto peptídeo sinal de 18 aa, um domínio extracelular de 220 aa, uma região transmembranar de 21 aa e um domínio citoplasmático de 31 aa. O B7 - H1 humano é constitutivamente expresso em vários órgãos, como coração, músculo esquelético, placenta e pulmão, e em quantidades menores no timo, baço, rim e fígado. A expressão de B7-H1 é regulada positivamente em uma pequena fração de células T e B ativadas e em uma fração muito maior de monócitos ativados. A expressão B7-H1 também é induzida em células dendríticas e queratinócitos após estimulação com IFN-gama. A interação de B7-H1 com PD-1 resulta na inibição da proliferação mediada por TCR-e na produção de citocinas. A via B7-H1:PD-1 está envolvida na regulação negativa de algumas respostas imunes e pode desempenhar um papel importante na regulação da tolerância periférica.
Dados típicos
| pg/ml | OD | Média | Corrigido | |
| 0.00 | 0.0240 | 0.0272 | 0.0256 | |
| 40.96 | 0.0357 | 0.0431 | 0.0394 | 0.0138 |
| 102.40 | 0.0584 | 0.0637 | 0.0611 | 0.0355 |
| 256.00 | 0.1099 | 0.1093 | 0.1096 | 0.0840 |
| 640.00 | 0.2389 | 0.2377 | 0.2383 | 0.2127 |
| 1600.00 | 0.6145 | 0.6434 | 0.6290 | 0.6034 |
| 4000.00 | 1.6350 | 1.7290 | 1.6820 | 1.6564 |
| 10000.00 | 3.6290 | 3.8300 | 3.7295 | 3.7039 |
Precisão
| Precisão intra-ensaio | Precisão Inter-ensaio | |||||
| Número da amostra | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| Média (pg/ml) | 209.2 | 1061.1 | 2965.9 | 236.7 | 1178.3 | 3104.7 |
| Desvio Padrão | 13.1 | 60.9 | 181 | 15.6 | 50 | 169.9 |
| Coeficiente de Variação (%) | 6.3 | 5.7 | 6.1 | 6.6 | 4.2 | 5.5 |
Precisão intraensaio (Precisão dentro de um ensaio) Três amostras de concentração conhecida foram testadas vinte vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Precisão Interensaio (Precisão entre ensaios) Três amostras de concentração conhecida foram testadas seis vezes em uma placa para avaliar a precisão intraensaio.
Recuperação de pico
A recuperação do pico foi avaliada adicionando 3 níveis de PD-L1 humano em amostra de soro humano saudável. O soro não enriquecido foi utilizado como branco nesta experiência.
A recuperação variou de 96% a 127%, com uma recuperação média global de 117%.
A recuperação variou de 96% a 127%, com uma recuperação média global de 117%.
Valores de amostra
| Matriz de Amostra | Amostra avaliada | Faixa (pg/ml) | Detectável (%) | Média de detectável (pg/ml) |
| Soro | 30 | nd-124,46 | 63 | 36.72 |
Soro/Plasma – Trinta amostras de voluntários aparentemente saudáveis foram avaliadas quanto à presença de PD-L1 neste ensaio. Nenhum histórico médico estava disponível para os doadores.
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